1-磷酸鞘氨醇(S1P)是一种具有生物活性的脂质，是细胞内重要的信使分子，参与多种生物过程的调节，如细胞增生、迁移、分化、凋亡等。缺氧不仅是脉络膜新生血管(CNV)的关键始发因素，也是许多眼部疾病的病理基础，而视网膜色素上皮(RPE)细胞也参与缺氧后新生血管的形成，缺氧条件下S1P对人RPE细胞增生和凋亡的影响尚不清楚。
观察缺氧条件下S1P对人RPE细胞增生和凋亡的影响，从而揭示S1P在CNV中的作用机制。
体外培养人RPE细胞株并进行传代，3～5代的RPE细胞分为6个组，空白对照组细胞进行常规培养，缺氧组细胞用200.00 μmol/L CoCl2培养细胞2 h，不同浓度S1P干预组(0.01、0.10、1.00、10.00 μmol/L)用200.00 μmol/L CoCl2培养细胞2 h后加入相应浓度的S1P，采用WST-1试剂盒检测各组细胞的吸光度(A)值；采用Hoechst染色检测各组细胞的凋亡情况，计算并比较各组细胞的凋亡率。
培养的细胞生长良好，可见细胞质内的色素颗粒。WST-1试剂盒检测显示，空白对照组细胞增生值(A值)为0.91±0.08，缺氧组为0.37±0.09，0.01、0.10、1.00和10.00 μmol/L S1P组分别为0.46±0.08、0.52±0.09、0.61±0.06和0.70±0.10，各组间的差异有统计学意义(F＝21.104，P＝0.000)，不同浓度S1P组A值均明显高于缺氧组，且随S1P浓度的升高而增加，差异均有统计学意义(均P<0.05)；不同浓度的S1P组细胞存活率均明显高于缺氧组。Hoechst染色显示，空白对照组RPE形态正常，可见少数凋亡细胞；缺氧组可见大量凋亡细胞，细胞核呈淡蓝色，染色质浓缩；S1P干预后凋亡细胞数较缺氧组减少，随着S1P浓度的增加，凋亡细胞数逐渐减少。空白对照组凋亡率为(1.21±0.08)%，缺氧组为(8.99±0.09)%，0.01、0.10、1.00和10.00 μmol/L S1P组的细胞凋亡率分别为(6.60±0.08)%、(5.95±0.09)%、(4.81±0.06)%和(3.96±0.10)%，6个组间细胞凋亡率的总体差异有统计学意义(F＝25.070，P＝0.000)，与缺氧组比较，各S1P组细胞凋亡率均明显降低，差异均有统计学意义(均P<0.05)，且随S1P的浓度升高其凋亡率逐渐降低。
缺氧条件下S1P对人RPE细胞的增生有促进作用，对细胞凋亡有抑制作用。
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脉络膜新生血管(choroidal neovascularization，CNV)是脉络膜的病理性新生血管，由于CNV的管壁通透性高及血管壁结构的缺陷，极易引起出血和渗出，继而形成瘢痕，严重影响视功能，是致盲的主要原因之一。目前CNV的形成机制尚未完成阐明，有研究发现，人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium，RPE)细胞代谢紊乱时可致其产物堆积在Bruch膜上，形成玻璃膜疣，导致氧的弥散障碍，从而诱发新生血管形成[1]。一些参与CNV形成的细胞因子，如血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor，PEDF)等主要由RPE细胞产生[2]，可见RPE细胞在CNV的发生及发展中起到举足轻重的作用。目前抗VEGF治疗虽然取得了令人瞩目的成绩，但仍有其局限性，寻找新的治疗靶点依旧是研究的热点[3,4]。1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phospate，S1P)是细胞膜磷脂代谢的重要脂质，由鞘氨醇激酶(sphingosine kinase，SPK)磷酸化鞘氨醇(sphingosine，SP)生成，可调节多种生物学作用，如促进细胞增生、抑制细胞凋亡、诱导细胞迁移，介导血管生成和炎症反应等病理生理过程[5]。有文献报道在小鼠眼内注射中和S1P单克隆抗体能有效抑制CNV[6]，但目前鲜见S1P与视网膜脉络膜血管疾病间关系的报道。本研究探索缺氧条件下S1P对人RPE细胞增生和凋亡的影响，为进一步阐明S1P在CNV形成机制中的作用提供理论依据。
