实验研究
选择性激光小梁成形术的激光效应对体外小梁细胞MMP-3及MMP-9表达的影响
中华实验眼科杂志, 2015,33(3) : 227-231. DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2015.03.008
摘要
背景

选择性激光小梁成形术(SLT)可增加前房水排出,降低开角型青光眼患者的眼压,但其作用机制尚不清楚。小梁网房水排出阻力受到细胞外基质(ECM)影响,基质金属蛋白酶3(MMP-3)、MMP-9与小梁网ECM的降解密切相关。

目的

利用永生化小梁细胞建立SLT激光效应模型,观察激光效应对小梁细胞表达MMP-3及MMP-9的影响。

方法

将永生化人小梁细胞与色素颗粒混悬液共同隔夜培养16 h,用SLT所用的Q开关倍频532 nm Nd:YAG激光照射人小梁细胞,制备SLT激光效应细胞模型,激光能量为0.2 mJ,光斑直径为400 μm,脉冲持续时间为3 ns。分别于激光照射后1、4、8、12和24 h,采用实时荧光定量PCR法检测激光照射前后小梁细胞中MMP-3 mRNA及MMP-9 mRNA的相对表达情况;ELISA法检测激光照射前后不同时间点培养液中MMP-3及MMP-9蛋白质量浓度的变化。

结果

SLT激光照射人小梁细胞前及照射后1、4、8、12和24 h后细胞中MMP-3 mRNA的相对表达量分别为1.00、1.32±0.12、2.08±0.05、2.34±0.04、2.77±0.05、2.49±0.27,各组间差异有统计学意义(F=15.966,P=0.007),其中激光照射后各时间点细胞中MMP-3 mRNA的相对表达量均明显高于对照组,至12 h表达量最高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。激光照射前后不同时间点细胞中MMP-9 mRNA的相对表达量分别为1.00、0.91±0.10、1.27±0.07、1.46±0.07、1.69±0.09、0.87±0.09,各组间差异有统计学意义(F=30.526,P=0.005),其中激光照射后4、8和12 h小梁细胞中MMP-9 mRNA的相对表达量明显高于对照组,差异均有统计学意义(P=0.001、<0.001、<0.001)。激光作用后不同时间点小梁细胞培养液中MMP-3及MMP-9蛋白的质量浓度均明显高于相应时间点对照组的检测值,差异均有统计学意义(均P<0.05)。

结论

SLT激光效应小梁细胞模型在激光作用后早期对MMP-3及MMP-9基因的表达和分泌均明显增加,但其表达随着激光照射后时间的延长而减弱。

引用本文: 张洪洋, 叶一明, 杨扬帆, 等.  选择性激光小梁成形术的激光效应对体外小梁细胞MMP-3及MMP-9表达的影响 [J] . 中华实验眼科杂志, 2015, 33(3) : 227-231. DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2015.03.008.
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选择性激光小梁成形术(selective laser trabeculoplasty,SLT)是利用Q开关倍频532 nm Nd:YAG激光对开角型青光眼的小梁网组织进行光凝,从而建立房水外流通道的治疗方法。SLT治疗过程中,激光脉冲选择性地作用于小梁网部位含有色素的小梁细胞,其高度的选择性和极短的脉冲时间可以减少激光对其周围小梁组织的损伤。美国FDA已于2001年批准SLT应用于临床,目前已成为原发性开角型青光眼(primary open angle glaucoma,POAG)治疗的首选方法之一[1],但SLT的降压幅度有限、降眼压作用逐渐减弱且作用机制尚不完全明确,因此探讨和寻找SLT发挥降眼压作用的机制是解决SLT存在问题的根本方法。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是一组锌与钙离子依赖性的肽链内切酶,其主要生物学功能是降解细胞外基质(extracellular matrix,ECM),其中MMP-3和MMP-9在小梁网组织中大量存在,在炎症刺激和重建房水外流通道过程中发挥调控作用。本研究利用永生化小梁细胞建立SLT激光效应模型,观察激光效应对小梁细胞中MMP-3和MMP-9表达的影响,探讨SLT的降眼压作用机制。

 
 
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