氧化应激被认为是年龄相关性白内障发生的主要因素之一，研究表明蛋氨酸亚砜还原酶B1（MsrB1）对于保护晶状体细胞抵抗氧化应激具有重要作用，然而，MsrB1基因沉默对H2O2诱导的人晶状体上皮细胞（LECs）的凋亡影响的机制尚不十分清楚。
探讨MsrB1基因沉默对H2O2诱导的人LECs凋亡及其细胞周期分布的影响。
人LECs细胞系SRA01/04在DMEM中进行培养，不同浓度的H2O2（200、400、600、800和1 000 μmol/L）加入培养基分别处理细胞12、24和36 h以选择最适浓度和作用时间。细胞分为正常对照组、MsrB1 siRNA转染组（将MsrB1 siRNA Lipofectamine 2000质粒转染入LECs）、H2O2诱导组（200 μmol/L作用LECs 24 h）和MsrB1 siRNA转染联合H2O2诱导组（转染MsrB1 siRNA脂质质粒后用H2O2处理细胞）。采用MTT法检测不同浓度H2O2诱导后人LECs 12、24和36 h细胞的存活率，并筛选H2O2处理作用最适的浓度和时间，用于进一步的细胞凋亡诱导实验；Real-time PCR法检测MsrB1 siRNA转染后24 h各组细胞中MsrB1 mRNA的相对表达水平；采用Hoechst 33528染色法观察各组细胞的细胞核形态变化；采用碘化丙啶（PI）染色法，用流式细胞仪检测细胞凋亡率和不同细胞周期的细胞比例。
正常对照组、H2O2诱导组、MsrB1 siRNA转染组细胞中MsrB1 mRNA的相对表达值为1.063±0.058、1.013±0.049和0.235±0.024，MsrB1 siRNA转染组细胞中MsrB1 mRNA的相对表达值明显低于正常对照组和H2O2诱导组，差异均有统计学意义（t=31.744、35.807，均P<0.001）。不同浓度H2O2处理后24 h细胞活力最低，以200 μmol/L H2O2处理后24 h为诱导人LECs凋亡的浓度和时间点。Hoechst 33528染色显示，H2O2诱导组可见部分细胞核收缩，MsrB1 siRNA转染组可见少数收缩变小的细胞核，MsrB1 siRNA转染联合H2O2诱导组收缩变小的细胞核多于H2O2诱导组。流式细胞术检测结果显示，正常对照组的凋亡细胞占（1.36±0.35）%，而MsrB1 siRNA转染组占（3.26±0.31）%，H2O2诱导组和MsrB1 siRNA转染联合H2O2诱导组细胞的凋亡率明显上升，分别为（5.13±0.59）%和（8.73±0.48）%。细胞周期检测结果表明，H2O2诱导组细胞周期阻滞在G2/M期。MsrB1 siRNA转染联合H2O2诱导组人LECs G1期所占比例为（52.78±1.68）%，明显高于H2O2诱导组的（44.99±1.37）%，而G2/M期细胞比例为（34.97±2.31）%，明显低于H2O2诱导组的（42.39±1.41）%，差异均有统计学意义（t=6.224、-6.213，均P<0.01）。
MsrB1基因通过调节细胞周期的细胞分布减少H2O2诱导的人LECs的凋亡。
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据报道，白内障已经成为人类致盲和视力残疾的主要因素，且对发展中国家造成了很大的经济和卫生负担[1,2]。氧化应激被认为是年龄相关性白内障发生的主要因素之一[3]。H2O2是晶状体和房水中与生理活动相关的氧化剂之一，白内障患者房水中的H2O2水平显著高于正常人，且体外研究发现，生理水平的H2O2会导致晶状体的混浊[4]。晶状体蛋白中的蛋氨酸很容易被氧化为蛋氨酸亚砜[5]，蛋氨酸亚砜还原酶(methionine sulfoxide reductases，Msrs)又可以将其还原为蛋氨酸[6]。MsrB1是一种硒蛋白，定位于细胞核和细胞质中，且广泛分布于哺乳动物的不同组织中[7,8]。有研究表明，MsrB1对于保护晶状体上皮细胞(lens epithelial cells, LECs)以抵抗氧化应激具有重要作用[7]。虽然H2O2诱导的人LECs凋亡的机制已有报道[9]，但MsrB1基因沉默对H2O2诱导的人LECs细胞周期的影响及其机制尚不明确。本研究探讨H2O2对人LECs的损伤过程，并观察MsrB1基因沉默对H2O2诱导的人LECs凋亡和细胞周期的影响。
