流行性角膜结膜炎是常见的眼部传染性疾病，腺病毒为常见病原体之一。六邻体蛋白是构建病毒衣壳的重要蛋白，也是病毒与抗体结合的主要靶点。应用针对六邻体蛋白编码区的测序方法可对腺病毒进行快速分型，对于流行性角膜结膜炎的早期诊断、病情监测和预后判断具有重要意义。
通过针对腺病毒六邻体蛋白编码区的测序，完成上海地区腺病毒与流行性角膜结膜炎相关的分子流行病学调查。
在受检者知情同意的情况下，收集2010年1月至2012年12月在上海市眼病防治中心和上海市急性出血性结膜炎防控办公室下属红眼病监测站点就诊的214例可疑流行性角膜结膜炎患者结膜囊的结膜拭子样本214份。对结膜囊标本提取DNA后，通过PCR法扩增病原体六邻体蛋白编码区内140 bp的保守序列，对于腺病毒阳性的标本，通过对六邻体蛋白保守区域内956 bp的序列进一步测序以确定其病毒分型。
在214例患者中，109例在通用PCR中显示腺病毒阳性，占50.93%。其中通过基因测序确定AdV1者4例，AdV2者33例，AdV3者15例，AdV4者12例，AdV8者19例，AdV19者15例，AdV37者8例。属于D组腺病毒的AdV8、AdV19和AdV37检出阳性患者更容易出现角膜炎症反应、伪膜性结膜炎和耳前淋巴结肿大等，而B组腺病毒检出阳性者易伴发上呼吸道感染，但角膜受累者较少。
针对六邻体蛋白编码区内保守区域的测序是腺病毒分型的重要方法之一，可快速确定流行性角膜结膜炎是否系腺病毒感染引起，并确定腺病毒分型。
版权归中华医学会所有。
未经授权，不得转载、摘编本刊文章，不得使用本刊的版式设计。
除非特别声明，本刊刊出的所有文章不代表中华医学会和本刊编委会的观点。
流行性角膜结膜炎是常见的眼部传染性疾病，常于春季和秋季爆发，通过接触分泌物传播，在封闭环境中该疾病的患病率可达80%以上，主要致病病毒为腺病毒、柯萨奇病毒和肠道病毒，腺病毒感染占50%以上。腺病毒复制力强，免疫原性强，这可以解释流行性角膜结膜炎易于流行且早期症状严重的特点。腺病毒包括A、B、C、D、E、F 6个亚组，引起急性结膜炎的主要病原体为B组的AdV3和AdV7，C组的AdV1、AdV2和AdV5以及E组的AdV4，引起流行性角膜结膜炎的主要为D组的AdV8、AdV19和AdV37亚型[1]。腺病毒是一种无外壳的双链DNA病毒，六邻体蛋白是构成腺病毒衣壳的重要蛋白，也是病毒与外界交换信息的重要结构以及与抗体结合的主要靶点[2]。在血清学上，血清中和实验识别六位体蛋白上的ε决定域；在基因学上，编码六邻体蛋白的区域是病毒基因组中变异最大的区域之一。因此，六邻体蛋白是腺病毒基因研究的热点区域[3, 4, 5, 6]，既与传统的血清学中和实验相关联，又可以研究病毒的变异与进化。随着基因技术的进步，通过PCR技术扩增分泌物中的病毒DNA片段，并对病毒进一步分型已成为国际上常见的研究方法，方法成熟，过程简单，结果可靠，但中国目前应用较少。本研究对可疑流行性角膜结膜炎患者的结膜囊样本进行PCR及基因测序，为相关的分子流行病学调查提供方法学基础。
