实验研究
细胞周期蛋白激酶抑制因子p21和p27在兔视网膜中的表达与细胞增生的关系
中华实验眼科杂志, 2015,33(11) : 969-973. DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2015.11.003
摘要
背景

细胞周期调节不平衡可诱发增生性玻璃体视网膜病变(PVR),研究周期蛋白依赖性激酶(CDK)及其抑制因子(CKI)对PVR形成过程中视网膜色素上皮(RPE)细胞和成纤维细胞病理增生过程中细胞周期的调控对PVR的防治具有重要意义。

目的

研究CKI p21和p27在不同发育阶段正常兔视网膜中的表达规律,探讨p21和p27表达与细胞生长的关系。

方法

按照兔龄将9只新西兰白兔分为10周龄组、20周龄组和30周龄组,每组3只。实验兔处死后取出双眼分别用于p21和p27在转录水平和翻译水平表达的检测。分离视网膜组织,采用real-time PCR和Western blot法分别检测不同周龄兔视网膜中p21和p27 mRNA及其蛋白的表达变化。

结果

10周龄组、20周龄组和30周龄组兔视网膜组织中p21 mRNA的相对表达量分别为1.631±0.063、1.506±0.012和1.585±0.015,p27 mRNA的相对表达量分别为1.581±0.048、1.470±0.012和1.490±0.013,总体比较差异均有统计学意义(p21:F=9.311,P=0.014;p27:F=12.360,P=0.007),其中10周龄组和30周龄组兔视网膜组织中p21和p27 mRNA的表达量均明显高于20周龄组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。10周龄组、20周龄组和30周龄组兔视网膜组织中p21蛋白的相对表达量分别为0.675±0.061、0.089±0.001和0.200±0.007,p27蛋白的相对表达量分别为0.928±0.019、0.183±0.005和0.576±0.089,总体比较差异均有统计学意义(p21:F=228.905,P<0.001;p27:F=148.957,P<0.001),其中10周龄组和30周龄组兔视网膜组织中p21和p27蛋白的表达量均明显高于20周龄组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。兔视网膜中p21与p27间mRNA及蛋白的相对表达量均呈正相关(mRNA:r=0.906,P<0.01;蛋白:r=0.913,P<0.01)。

结论

p21和p27在生长发育期的兔视网膜中表达量升高,随着生长过程变缓其表达量降低,之后随着视网膜组织老年性变化发生病理性表达增加,在细胞周期调控过程中可能起着平衡作用。

引用本文: 王晓辉, 谢茂松, 陈鲤敏, 等.  细胞周期蛋白激酶抑制因子p21和p27在兔视网膜中的表达与细胞增生的关系 [J] . 中华实验眼科杂志,2015,33 (11): 969-973. DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2015.11.003
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增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)的基本病理特征是由于细胞周期调节不平衡所致的视网膜色素上皮(retinal pigment epithelum,RPE)细胞的异常增生[1]。影响细胞周期调控的决定因素是周期蛋白依赖性激酶(cyclin dependent kinase,CDK)与CDK抑制因子(cyclin-dependent kinase inhibitor,CKI)之间的平衡状态[2]p21基因属于CKI基因,p27基因是一种与细胞周期调控有关的重要基因之一,是属于非特异CKI,在阻止细胞周期的进程中起关键作用,可有效地抑制细胞增生[3]。本研究组前期研究表明,在兔晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LECs)中p21和p27的表达有一定规律,p21和p27与兔LECs增生有关[4],但是目前p21和p27与视网膜增生病变的关系尚不完全清楚。本研究中检测兔视网膜组织中p21和p27的表达水平,研究p21和p27与视网膜组织生长的关系及其机制,为寻求防治PVR的方法提供实验依据。

 
 
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