脉络膜新生血管(CNV)是多种眼底疾病致盲的病理基础，视网膜色素上皮(RPE)细胞氧化应激损伤在CNV生成中具有重要作用。RPE氧化应激损伤能激活肿瘤坏死因子超家族的p75NTR受体，引起血管内皮细胞增生，但其调控机制尚未明确。
探讨RPE细胞中p75NTR受体在CNV形成过程中的作用，并对其作用机制进行分析。
体外培养人RPE细胞(ARPE19细胞系)，用p75NTR受体过表达质粒转染RPE细胞，分别采用逆转录PCR(RT-PCR)和Western blot法进行转染细胞中p75NTR受体基因和蛋白水平检测，以未转染p75NTR受体过表达质粒的RPE细胞作为对照组。采用BrdU法检测各组细胞的增生活性；采用Annexin V-FITC/PI双染法及流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率；用H2DCFDA荧光法和流式细胞计数检测细胞内活性氧簇(ROS)阳性百分数；采用激光扫描共焦显微镜观察各组细胞线粒体标志物的表达(膜电位)及细胞色素C的表达；采用Western blot法检测和比较各组细胞中裂解caspase-3、Fas及血管内皮生长因子165(VEGF165)蛋白的相对表达水平。
p75NTR受体质粒转染组细胞中p75NTR受体的mRNA及蛋白表达量分别是对照组的(6.11±0.77)倍和(7.42±0.48)倍，差异均有统计学意义(t＝11.49、23.17，均P<0.01)。BrdU法检测结果显示，p75NTR受体质粒转染12、24、36和48 h组细胞的增生活性(A值)率分别为(93.12±0.56)%、(86.30±0.66)%、(72.53±0.86)%和(60.77±2.81)%，对照组为100%，随着p75NTR受体质粒转染时间的延长，RPE细胞活性值逐渐减低，细胞凋亡百分数明显增加，与对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。p75NTR受体质粒转染组转染后48 h，RPE细胞内ROS相对荧光强度为对照组的2.4倍，差异有统计学意义(t＝16.45，P<0.01)；对照组RPE细胞中线粒体标志物阳性细胞比例为100%，而p75NTR受体质粒转染组细胞中线粒体标志物阳性细胞比例为(37.30±2.06)%，2个组比较差异有统计学意义(t＝57.71，P<0.01)。p75NTR受体质粒转染组RPE细胞中细胞色素C的荧光强度明显高于对照组，与对照组比较，p75NTR受体质粒转染组RPE细胞中裂解caspase-3、Fas及VEGF165蛋白表达水平明显升高，差异均有统计学意义(均P<0.01)。
p75NTR受体过表达引起RPE细胞线粒体损伤及细胞凋亡，同时刺激RPE细胞分泌血管生成因子，促进CNV的形成。p75NTR受体可能是调控RPE损伤的另一个重要通路。
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脉络膜新生血管(choroidal neovascularization，CNV)是正常脉络膜毛细血管在各种病理因素的刺激下经出芽、迁移、增生、基质重塑等而逐渐形成的新生毛细血管床。CNV管壁发育不完整，血管脆性大，极易发生渗出和破裂出血等病理变化，引发结缔组织增生，最终形成瘢痕，导致不可逆性盲[1]。CNV是湿性年龄相关性黄斑变性、病理性近视、中心性渗出性脉络膜病变等致盲眼病的首要致病因素[2]。视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial，RPE)细胞氧化损伤可能是年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration，AMD)发生和发展的病理基础[3]，氧化应激产生的活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)使RPE细胞代谢能力减退，加速AMD的发生和发展[4]。研究发现RPE氧化损伤能激活肿瘤坏死因子超家族的p75NTR受体，引起血管内皮细胞增生，但其调控机制尚未明确[5]。p75NTR受体是最早发现的神经营养因子受体，一方面通过与配体结合而活化细胞内的死亡结构域，募集NRAGE(neurotrophin receptor p75-interacting MAGE homolog)、NADE(p75NTR-associated cell death executor)等适配体，通过JNK、核转录因子-κB(nuclear factor-κB，NF-κB)、caspase-3/9、细胞周期抑制等途径介导程序性细胞死亡，另一方面在没有配体结合的情况下，p75NTR受体可通过caspase、细胞周期抑制等途径介导细胞损伤[6]。本研究中通过体外实验研究p75NTR受体过表达对RPE细胞氧化损伤的作用及其可能的作用机制，探讨p75NTR受体防治CNV的可能性。
