miRNAs是一类非编码的小分子RNA，对LECs的凋亡发挥调控作用，但miRNAs对年龄相关性白内障患者LECs中氧化损伤的生物学效应及其机制仍需进一步研究。
探讨miR-204在体内及体外对年龄相关性白内障氧化损伤的作用及其机制。
收集20例年龄相关性白内障患者的晶状体前囊膜和20个正常供体眼晶状体前囊膜，采用实时荧光定量PCR法检测2个组晶状体前囊膜中miR-204的表达量。对人晶状体上皮细胞系HLE-B3进行培养，在细胞培养液中添加200 μmol/L H2O2建立LECs氧化损伤模型，然后将细胞分为模型对照组、miR-204拟似物组、拟似物对照组、miR-204拮抗物组、拮抗物对照组，分别在细胞培养液中添加相应的转染剂，未用H2O2处理的LECs作为正常对照组。转染后24 h采用实时定量PCR法测定各组LECs中miR-204 mRNA的表达以验证转染率；采用流式细胞仪测定体外各组细胞的凋亡率；采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测LECs中TP53INP1及p53 mRNA和蛋白的相对表达量。
年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜中miR-204 mRNA相对表达量明显低于正常人，差异有统计学意义(t＝14.21，P<0.05)。正常对照组、模型对照组、miR-204拟似物组、拟似物对照组、miR-204拮抗物组、拮抗物对照组细胞凋亡率分别为1.31±0.12、4.90±0.28、2.60±0.15、4.39±0.20、5.74±0.13和4.34±0.63，模型对照组细胞凋亡率明显高于正常对照组，差异有统计学意义(t＝－20.69，P<0.01)；miR-204拟似物组细胞凋亡率明显低于拟似物对照组，而miR-204拮抗物组细胞凋亡率明显高于拮抗物对照组，差异均有统计学意义(t＝－12.20，P<0.01；t＝3.79，P<0.05)。实时荧光定量PCR和Western blot法检测结果显示，模型对照组细胞中TP53INP1、p53 mRNA及蛋白的相对表达量明显高于正常对照组，差异均有统计学意义(mRNA相对表达量：t＝6.44、11.71，均P<0.01；蛋白相对表达量：t＝10.72、t＝19.40，均P<0.01)；miR-204拟似物组细胞中TP53INP1、p53 mRNA和蛋白的相对表达量低于拟似物对照组，差异均有统计学意义(mRNA相对表达量：t＝－19.28、－10.58，均P<0.01；蛋白相对表达量：t＝－6.50、－6.36，均P<0.05)；miR-204拮抗物组TP53INP1、p53 mRNA的相对表达量高于拮抗物对照组，差异均有统计学意义(mRNA相对表达量：t＝4.07、3.74，均P<0.05；蛋白相对表达量：t＝7.18、10.58，均P<0.05)。
MiR-204通过下调靶基因TP53INP1在LECs中的表达抑制LECs的凋亡，从而对年龄相关性白内障LECs发挥抗氧化损伤作用，该作用可能是通过影响TP53INP1-p53通路实现的。
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白内障是常见的致盲疾病，其发病机制与年龄、性别、辐射、外伤、手术、氧化作用等多种因素有关[1,2,3]，其中年龄相关性白内障的发病机制主要包括氧化应激、紫外线损伤、钙蛋白酶激活、细胞凋亡等[4]。近年来的研究发现，微小RNA(microRNA，miRNA)对人晶状体上皮细胞(lens epithelial cells，LECs)的凋亡发挥不同程度的调控作用，进而影响年龄相关性白内障的病程[5,6]，如miR-125通过抑制靶基因p53的表达来抑制LECs凋亡，miR-34a或let-7等分别通过不同途径参与白内障的发病过程[7,8]。MiRNA广泛表达于视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium，RPE)、晶状体、睫状体和神经视网膜层，miR-204表达于LECs中[9]，通过Meis-2调控PAX6的转录，继而影响晶状体的分化。目前关于miR-204在年龄相关性白内障发病过程中与氧化损伤的关系国内外鲜有报道。我们前期的研究中利用生物信息学预测分析软件TargetScan、miRanda等共同进行预测和研究，显示TP53INP1是miR-204的靶基因之一，同时我们也利用双荧光素酶报告基因也验证了这一结果。本研究中拟探讨miR-204对年龄相关性白内障氧化损伤的抑制作用及其相关机制。
