实验研究
经房角镜光凝小梁网法建立慢性高眼压大鼠模型及其与经角膜缘光凝法的比较
中华实验眼科杂志, 2016,34(7) : 580-584. DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2016.07.002
摘要
背景

慢性高眼压动物模型的建立是青光眼发病机制研究的基础,以往激光光凝建立慢性高眼压动物模型的方法存在模型眼压波动大,需要重复光凝和并发症多的问题,造模方法的改良对于顺利开展相关的实验研究具有重要意义。

目的

用经房角镜光凝小梁网法建立大鼠慢性高眼模型,并与以往的经角膜缘光凝法进行比较。

方法

选取8~12周龄清洁级Fischer344大鼠36只,将动物分为正常对照组、经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组,每组12只,经角膜缘光凝组采用532 nm YAG激光经角膜缘光凝大鼠右眼小梁网建立慢性高眼压模型,激光能量为440~500 mW,激射光斑40~60个;经房角镜光凝组激光能量为800~850 mW,激射光斑100~120个。光凝后用Tonolab眼压计测量并观察各组大鼠眼压变化;于光凝后第3周每组处死5只大鼠,分离视网膜,采用免疫荧光技术检测并比较各组大鼠视网膜中Tuj-1阳性的视网膜神经节细胞(RGCs)数目。实验动物的使用及喂养遵循ARVO声明。

结果

造模后3周各组大鼠一般情况可,眼表无明显损伤。经角膜缘光凝组和房角镜光凝组慢性高眼压模型的成模率分别为75%和100%。正常对照组、经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组大鼠模型眼造模后3周的平均眼压分别为(11.0±1.3)、(23.4±12.6)和(25.3±4.9)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),峰眼压分别为(12.3±1.0)、(50.5±7.3)和(44.3±12.3)mmHg,组间总体比较差异均有统计学意义(F=25.496、80.762,均P<0.001),其中经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组大鼠模型眼平均眼压均明显高于正常对照组,差异均有统计学意义(均P<0.001),而2个组间平均眼压和峰眼压差异均无统计学意义(P=1.000、0.195)。正常对照组、经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组大鼠视网膜中Tuj-1阳性RGCs数目分别为(2 048.2±148.5)、(645.2±177.1)及(1 223.7±148.6)/mm2,总体比较差异有统计学意义(F=98.767,P<0.001),其中经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组大鼠视网膜中Tuj-1阳性RGCs数目均明显少于正常对照组,且经角膜缘光凝组大鼠视网膜中Tuj-1阳性RGCs数目明显少于经房角镜光凝组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。

结论

经房角镜光凝小梁网能够诱导大鼠慢性高眼压并导致RGCs损害,但眼压升高模式及RGCs损害程度与经角膜缘光凝法有所不同,经房角镜光凝法建立慢性高眼压模型成模率更高。

引用本文: 马迪, 黄楚开, 岑令平, 等.  经房角镜光凝小梁网法建立慢性高眼压大鼠模型及其与经角膜缘光凝法的比较 [J] . 中华实验眼科杂志, 2016, 34(7) : 580-584. DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2016.07.002.
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青光眼是一类以视神经受损以及特征性视野缺损为特征的眼科疾病,其主要病理特征是多种因素导致的视网膜神经节细胞(retinal ganglial cells,RGCs)死亡和凋亡,而病理性眼压升高是其主要的致病因素[1]迄今为止,青光眼的发病及视神经损害机制尚未完全阐明。慢性高眼压动物模型能够较好地模拟人青光眼视网膜神经损伤的病理过程,对相关病理机制的研究有重要作用。目前,常用的鼠类慢性高眼压模型构建方法包括激光光凝法、注射高渗盐水法及烧灼、结扎巩膜浅层静脉法和前房注射微粒法等。每种模型各有优缺点[2],目前尚无一致公认的理想或标准模型,造模方法的改良对于顺利开展相关的实验研究具有重要意义。激光光凝法诱导的慢性高眼压动物模型已经被多次报道应用于实验研究,包括采用氩激光或二极管激光光凝角巩膜缘小梁网对应的表区域、光凝角膜缘静脉丛及经角膜以一定角度光凝周边房角及小梁网组织等方法[3,4],具有易操作、省时、炎症反应轻、RGCs损害明显及可通过调整激光能量控制眼压升高幅度的特点,具有较好的代表性,但该方法需重复激光以维持眼压[3,5,6],眼压波动明显,组内个体差异大,且易损害眼部血液循环或者周围组织、引起前房出血、角膜病变等并发症[7]。既往有报道灵长类动物应用Argon激光房角镜下直接光凝小梁网组织可诱导慢性高眼压[8],但灵长类动物的价格昂贵,相关的鼠类慢性高眼压制作方法和效果鲜见报道,探讨鼠慢性青光眼模型新的制作方法可为慢性高眼压发病机制和治疗研究提供方法学基础。Smith等[9]应用房角镜成功观察鼠类房角结构及形态,使得房角镜下激光光凝内部小梁网诱导慢性高眼压模型方法应用于鼠类成为可能。本研究拟建立房角镜下激光光凝小梁网的方法诱导大鼠慢性高眼压动物模型。从诱导方法及实验条件的相似性等方面考虑,本研究对经房角镜及经角膜缘激光光凝小梁网两种慢性高眼压建模方法的效果进行比较。

 
 
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