实验研究
正常兔眼玻璃体微泡注射联合超声辐照干预中最适超声参数的筛选
中华实验眼科杂志, 2016,34(11) : 983-988. DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2016.11.005
摘要
背景

微泡可作为药物和基因的转染载体,经超声照射后转染效率提高,从而在多种眼科疾病的治疗方面发挥重要作用。然而,不同超声辐照强度发挥的生物学效应有所不同。

目的

筛选适用于正常兔视网膜组织的超声辐照强度和时间,为超声联合微泡治疗眼底疾病的研究提供实验依据。

方法

选取18只清洁级新西兰大白兔,按照随机数字表法分为空白对照组、单纯超声辐照组、单纯玻璃体腔注射组及玻璃体腔注射+低、中、高强超声辐照组。空白对照组未给予任何处理,单纯超声辐照组和单纯玻璃体腔注射组分别给予2.0 W/cm2的超声强度照射实验眼60 s或单纯玻璃体腔注射0.1 ml微泡,玻璃体腔注射+低、中、高强超声辐照组兔眼在玻璃体腔注射0.1 ml微泡后分别用0.5、1.0和2.0 W/cm2超声强度照射实验眼60 s。各组于术前、术后即刻、术后第1天、第7天分别行眼前节照相、直接检眼镜检查和彩色眼底照相观察眼前节和眼底情况,于术后第7天处死实验兔并分离视网膜,行苏木精-伊红染色,光学显微镜下观察实验眼视网膜形态学改变,透射电子显微镜观察兔视网膜超微结构变化。

结果

空白对照组、单纯超声辐照组、单纯玻璃体腔注射组及玻璃体腔注射+低、中、高强超声辐照组兔手术前后不同时间点眼前后节均未见明显异常。术后7 d,光学显微镜下可见空白对照组、单纯超声辐照组、单纯玻璃体腔注射组和玻璃体腔注射+低超声辐照组兔10层视网膜组织结构清晰,未见炎症、变性及细胞坏死等改变,而玻璃体腔注射+中强超声辐照组和玻璃体腔注射+高强超声辐照组兔眼视网膜各层组织结构疏松,视细胞层排列紊乱,内核层和外核层不同程度变薄,视网膜神经节细胞(RGCs)数量减少,可见细胞的空泡样变性。透射电子显微镜下可见空白对照组、单纯超声辐照组、单纯玻璃体腔注射组及玻璃体腔注射+低强超声辐照组兔视网膜超微结构未见明显异常改变,而玻璃体腔注射+中强超声辐照组和玻璃体腔注射+高强超声辐照组兔眼视细胞排列紊乱,内核层和外核层细胞数目减少,细胞排列紊乱,细胞核染色质不均匀,RGCs数目减少。

结论

适用于正常兔视网膜组织的理想超声参数为超声强度0.5 W/cm2辐照60 s,这一结果为超声联合微泡治疗眼底疾病的研究提供了实验依据。

引用本文: 申晓丽, 李强, 黄丽娜, 等.  正常兔眼玻璃体微泡注射联合超声辐照干预中最适超声参数的筛选 [J] . 中华实验眼科杂志,2016,34 (11): 983-988. DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2016.11.005
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微泡是含有气体的微球,其最内层为惰性气体氟烷,中间层为油层,外壳由人体清蛋白、脂类、糖类和可降解的多聚物构成,主要用于溶栓、携带药物或基因治疗疾病[1]。研究发现,微泡造影剂除具有增强显影的作用外,还具有药物或基因载体的作用,且经超声辐照后可大大提高药物或基因的转染效率[2,3]。由于不同类型、不同剂量的超声微泡造影剂和超声辐照参数对不同组织细胞具有不同的生物学效应,因此,深入研究超声辐照参数对不同组织细胞的超声生物学效应非常重要,如何选择不同组织的最佳超声辐照条件是目前的研究方向。本研究旨在观察不同超声声强和超声辐照时间下微泡注射联合超声辐照对正常兔视网膜组织的影响,筛选出作用于正常兔视网膜组织的适宜超声声强和辐照时间,为超声微泡作为基因或药物载体用于治疗眼底疾病提供实验依据。

 
 
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