青光眼滤过性手术后手术区域瘢痕化是导致抗青光眼手术失败的主要因素，因此越来越多的研究关注瘢痕形成的原因和过程。
比较青光眼滤过术后滤过区人瘢痕组织来源成纤维细胞(HSFs)与人正常Tenon囊来源成纤维细胞(HTFs)增生迁移能力的差异以及微小RNA200a(miR-200a)对结膜成纤维细胞生物学行为的抑制作用，并探讨产生这种差异的可能机制。
收集斜视手术过程中切取的正常Tenon囊组织和青光眼滤过术后手术区瘢痕组织，对成纤维细胞进行原代培养，采用细胞计数试剂盒8(CCK8)法检测不同来源成纤维细胞的增生能力；采用细胞划痕试验检测细胞的相对迁移距离；采用实时荧光定量PCR法检测不同来源成纤维细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA和miR-200a mRNA的表达。于HTFs培养基中分别加入0、1、2和5 ng/ml TGF-β1拟似物，于HSFs培养基中分别加入0.00、0.25、0.50、1.00 μg/ml TGF-β1抑制剂，细胞处理24 h，采用CCK8法检测细胞增生能力；用2 ng/ml TGF-β1拟似物处理HTFs，用1.00 μg/ml TGF-β1抑制剂处理HSFs，分别采用划痕法检测不同处理组细胞的相对迁移距离，采用实时荧光定量PCR法检测不同处理组细胞中miR-200a mRNA的相对表达量。
原代培养的细胞胞体较大，呈纺锤形或星形，细胞核呈卵圆形，对角蛋白抗体呈弱阳性反应，对波形蛋白抗体呈阳性反应。HSFs的增生值(A值)为1.476±0.110，明显高于HTFs的0.958±0.074，差异有统计学意义(t=24.900，P=0.016)；HSFs中TGF-β1 mRNA相对表达量高于HTFs，是HTFs的(1.739±0.205)倍，差异有统计学意义(t=6.358，P=0.024)；HSFs中miR-200a mRNA的相对表达量明显低于HTFs，是HTFs的(46.23±10.78)%，差异有统计学意义(t=7.394，P=0.018)。与添加2 ng/ml TGF-β1拟似物的HTFs相比，添加TGF-β1拟似物的HSFs相对迁移距离增加了(3.533±0.402)倍，miR-200a mRNA相对表达量低至(45.4±7.3)%，差异均有统计学意义(均P<0.05)；与添加1.00 μg/ml TGF-β1抑制剂的HTFs相比，培养基中添加TGF-β1抑制剂后，HSFs的相对迁移距离幅度降低至(64.3±6.5)%，miR-200a mRNA相对表达量明显增加(3.106±0.415)倍，差异均有统计学意义(均P<0.05)。
HSFs的增生及迁移能力均明显强于HTFs，可能与HSFs中miR-200a表达量低有关。MiR-200a与TGF-β1在调控成纤维细胞的增生和迁移能力方面发挥相反的作用。
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抗青光眼滤过术后滤过泡组织的纤维，特别是Tenon囊与巩膜表面组织之间的瘢痕化影响滤过泡的房水外流功能，是降低青光眼手术成功率的主要原因。研究显示，成纤维细胞功能增强是启动瘢痕形成的主要原因，而炎症及免疫调控与成纤维细胞的功能密切相关[1,2]。研究证实，增生性瘢痕组织构成以功能活跃的成纤维细胞和成肌纤维细胞为主，而转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)是调节成纤维细胞增生能力的关键因素[3,4]。微小RNA(micro RNA，miRNA)在细胞的增生、分化和凋亡过程中发挥重要的调控作用，与细胞的增生、迁移和侵袭能力密切相关[5,6]。miRNA家族中的miR-200、miR-192和miR-215均与TGF-β/Smad信号途径相互影响，miR-200a是miR-200家族中促进细胞迁移作用最强的成员[7,8,9]。miR-200家族中既包括致癌基因，又包括肿瘤抑制基因，其中miR-200a是已知的肿瘤抑制基因，可引起上皮样分化并抑制多种肿瘤细胞的上皮－间充质转化过程，推测miR-200a参与成纤维细胞的生物活动，但目前鲜有成纤维细胞增生与miR-200a相关性的研究报道[10,11,12]。本研究中对体外培养的正常人Tenon囊来源成纤维细胞(human Tenon capsular-derived fibroblasts，HTFs)与人瘢痕组织来源成纤维细胞(human scarring-derived fibroblast，HSFs)的增生和迁移能力进行比较，探讨miR-200a与TGF-β1调控成纤维细胞增生和迁移的共同作用。
