Myocilin蛋白的错误折叠是原发性开角型青光眼(POAG)的重要发病机制，GRP78能将错误折叠的蛋白质转移到内质网外，以保持应激状态下内质网蛋白质合成功能的正常运转，但二者的相互关系及其在POAG发病中的作用机制仍未阐明。
检测体外培养的POAG患者小梁细胞内GRP78与Myolicin蛋白的共定位表达。
在手术中获取POAG患者的小梁网组织，采用组织块培养法分离和培养小梁细胞，采用免疫化学染色法检测培养的细胞中特征性因子的表达，并将其形态学特征与健康供体眼培养的小梁细胞进行比较。将体外培养的小梁细胞分为衣霉素(Tm)组、十字孢碱(STS)组和正常对照组，分别在培养液中加入含有1 μmol/L Tm、0.1 μmol/L STS和不含药物的培养液培养细胞24 h，采用免疫荧光法检测各组培养的细胞中GRP78与Myocilin蛋白的共表达情况。
培养的原代细胞多呈扁平星形或不规则形，可见细胞突起，细胞核呈椭圆形，细胞体较大，细胞质丰富，可见大量黑色吞噬颗粒。POAG来源小梁细胞培养3～7代生长良好，细胞中层黏连蛋白(LN)、纤维连接蛋白(FN)、神经烯醇化酶(NSE)和波形蛋白(Vimentin)均呈阳性表达。免疫荧光染色结果显示，Tm组、STS组和正常对照组细胞的细胞质中均可见GRP78和Myocilin阳性表达，分别为红色和绿色荧光，正常对照组中人来源小梁细胞的周边部可见GRP78和Myocilin的不完全共表达，POAG来源小梁细胞周边部GRP78和Myocilin呈完全共表达；Tm组和STS组中不同来源的小梁细胞中GRP78和Myocilin均呈完全共表达，Tm组中不同来源小梁细胞均出现细胞核周围GRP78蛋白聚集现象。
POAG来源小梁细胞中GRP78蛋白与Myocilin蛋白共表达，提示二者在POAG的发病和进展过程中可能存在相互作用。GRP78可能保护小梁细胞免受内质网应激途径诱导的细胞凋亡。
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青光眼为不可逆性致盲眼病，其中原发性开角型青光眼(primary open angle glaucoma，POAG)是常见类型之一。目前，POAG的发病机制尚不十分明确。关于POAG发病机制的研究多涉及基因突变位点的检测、编码蛋白错误折叠导致的小梁细胞功能异常以及线粒体功能障碍介导的小梁细胞凋亡[1,2,3,4]。由于基因突变Myocilin蛋白不能转移，在内质网中堆积引起了PERK(PKR-like ER kinase)从GRP78复合物中释放出来，激活CHOP蛋白表达，最终导致小梁细胞凋亡。同时研究发现，突变型Myocilin蛋白以积聚体形式存在于小梁细胞的细胞质内，并产生细胞毒性，激活GRP78表达上调，导致小梁细胞功能异常，甚至发生凋亡[5,6]。近年来研究认为细胞受刺激时GRP78呈高表达并合成GRP78的反应可能是细胞一种重要的防御机制，该机制对细胞有保护作用，从而延长在各种不利因素刺激下细胞的生存期。GRP78能将错误折叠的蛋白质转移到内质网外，以保持应激状态下内质网蛋白质合成功能的正常运转，但二者的相互关系及其在POAG发病中的作用机制仍未阐明。为进一步明确GRP78在细胞内的分布及其与Myocilin蛋白的共定位情况，本研究通过体外培养正常人来源及POAG患者来源的小梁细胞，分别应用内质网应激诱导剂衣霉素(tunicamycin，Tm)和凋亡诱导剂十字孢碱(staurosporine，STS)作为内质网应激刺激因素，观察细胞中GRP78蛋白与Myocilin蛋白在小梁细胞内的表达与分布情况。
