实验研究
泪腺作为潜在人免疫缺陷病毒储存库的分子机制研究
中华实验眼科杂志, 2017,35(5) : 410-415. DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2017.05.005
摘要
背景

获得性免疫缺陷综合征(AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的以全身免疫系统严重损害为特征的感染性疾病,目前主要的治疗方法是高效抗逆转录病毒疗法(HAART),但不能彻底清除患者体内的免疫缺陷病毒(HIV),目前认为是病毒潜伏于HIV储存库所致。研究证实HAART治疗后患者血浆中HIV载量检测阴性的AIDS患者的泪液中发现了HIV,因此探索其眼部储存库是非常重要的。

目的

探讨泪腺组织是否具有HIV储存库的分子基础以及HIV感染泪腺组织的发生机制。

方法

收集2013年11月至2015年12月在北京协和医院因泪腺良性疾病行泪腺手术获得的泪腺组织标本14例,其中13例来自于HIV阴性患者,1例来自于HIV阳性患者。13例HIV阴性患者临床诊断为泪腺脱垂者9例和泪腺炎者4例,病理诊断为正常泪腺组织者12例和泪腺间质淋巴组织增生者1例。HIV阳性患者的临床诊断为泪腺炎,病理诊断为泪腺间质淋巴组织增生。将12例HIV阴性和1例HIV阳性患者的泪腺组织标本用石蜡固定切片,采用免疫组织化学法检测泪腺标本中HIV受体CD4及CXC趋化因子受体4(CXCR4)和CC趋化因子受体5(CCR5)分子的表达;1例HIV阴性患者的泪腺组织标本制备成新鲜冰冻切片,采用免疫荧光染色对泪腺标本中CD4及CXCR4和CCR5分子的表达进行验证。

结果

免疫组织化学染色显示,HIV阴性患者泪腺组织CD4分子染色背景强,为可疑阳性表达;各例标本中多数泪腺上皮细胞可见CXCR4表达,定位于细胞质和细胞核,少数泪腺上皮细胞不表达CXCR4;在各例标本中少数泪腺上皮细胞中CCR5呈局灶阳性表达,主要位于细胞质和细胞核,多数泪腺上皮细胞不表达CCR5。HIV阳性患者泪腺组织中CD4分子染色背景强,为可疑阳性表达;CXCR4及CCR5在泪腺上皮细胞中为阳性表达;间质组织中可见大量散在淋巴细胞,其CD4、CXCR4及CCR5均为阳性表达。免疫荧光染色显示,HIV阴性患者泪腺组织中CD4、CXCR4、CCR5均呈红色荧光,CD4呈线状及片状分布,主要定位于泪腺上皮细胞的细胞膜,而CXCR4和CCR5则呈现散在点状分布,定位于泪腺上皮细胞的细胞质。

结论

HIV相关分子受体CD4及其辅助受体CXCR4、CCR5在泪腺上皮细胞均呈阳性表达,泪腺上皮细胞具有受到HIV感染和成为HIV储存库的分子基础。

引用本文: 刘子扬, 刘小伟, 叶俊杰, 等.  泪腺作为潜在人免疫缺陷病毒储存库的分子机制研究 [J] . 中华实验眼科杂志, 2017, 35(5) : 410-415. DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2017.05.005.
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获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染引起的以全身免疫系统严重损害为特征的感染性疾病。HIV通过其表面糖蛋白gp120与靶细胞表面蛋白的CD4结合并在CXC趋化因子受体4(C-X-C chemokine receptor 4,CXCR4)和CC趋化因子受体5(C-C chemokine receptor type 5,CCR5)的帮助下进入人体细胞引起感染,造成CD4T淋巴细胞数量进行性减少和细胞免疫功能损害,最后导致各种机会性感染和肿瘤的发生[1]。高效抗逆转录病毒疗法(high active antiretroviral therapy,HAART),即鸡尾酒疗法,是治疗AIDS最有效的方法。HAART可使患者血浆中HIV RNA水平下降乃至无法检出(<50拷贝数/ml),但不能彻底清除患者体内的HIV病毒,且突然中止HAART治疗可导致外周血中病毒载量迅速反跳[2,3,4],病毒载量反跳主要来自于全身HIV储存库中释放的HIV。静息状态下,HIV病毒以低转录水平潜伏在HIV储存库中,一定刺激下被激活并重新进行病毒复制[5,6,7],导致疾病复发。因此,HIV病毒储存库是HAART无法将患者体内病毒彻底清除的主要原因。目前,HIV储存库分为细胞储存库和解剖学储存库[7,8,9],CD4T淋巴细胞是HIV感染的主要靶细胞,虽然HIV感染CD4T淋巴细胞后可导致细胞死亡[10,11],仍有一些细胞转变为休眠的记忆细胞,HIV前病毒可在记忆细胞中整合为完整的基因组[12]。中央和迁移的记忆CD4T淋巴细胞是HIV的主要细胞储存库[8],单核细胞和巨噬细胞也是HIV的细胞储存库[7,13],其他的细胞储存库包括自然杀伤细胞、星形细胞、肾小管上皮细胞和胸腺细胞[14,15,16]。解剖学储存库主要为淋巴结、脾脏、肠相关淋巴组织、生殖器官、中枢神经系统和肺脏[17,18,19]。我们前期的研究首次报道了在HAART治疗有效的AIDS患者泪液中发现了HIV病毒[20],由于泪液主要来自于泪腺上皮细胞,由此推测泪腺可能为HIV的潜在储存库。本研究拟通过分析泪腺上皮细胞中HIV感染相关分子CD4及其受体CXCR4和CCR5的表达,从分子水平探讨泪腺组织在HIV感染中的作用及其机制。

 
 
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