实验研究
胰岛素样生长因子-1对甲状腺相关眼病眼眶成纤维细胞的促生长作用
中华实验眼科杂志, 2017,35(9) : 805-810. DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2017.09.008
摘要
背景

甲状腺相关眼病(TAO)是一种自身免疫性疾病,目前对其发病机制的研究主要集中在共同抗原上。胰岛素样生长因子-1(IGF-1)功能的发挥需要IGF-1受体(IGF-1R)的参与,IGF-1在促甲状腺激素受体(TSHR)的信号传导通路中也起着重要作用。

目的

探讨IGF-1对TAO患者眼眶成纤维细胞(OFs)增生及IGF-1R、TSHR表达的影响,探讨IGF-1在TAO发病机制中的作用。

方法

收集2016年3—6月于四川大学华西医院行TAO眼眶脂肪切除术取得的眶组织标本17例17份及正常人美容手术取得的眼眶组织4人4份,采用含体积分数5%胎牛血清的DMEM/F12培养液培养OFs。分别于培养液中加入不同质量浓度(0、50、100、125 μg/L)的IGF-1,采用MTS比色法绘制OFs生长曲线,评估IGF-1对TAO和正常来源OFs增生的影响;采用流式细胞术测定不同质量浓度IGF-1对TAO和正常来源OFs中IGF-1R、TSHR表达水平的影响。

结果

TAO患者与正常人来源的OFs均生长良好,呈梭形,细胞质丰富,TAO患者与正常人来源的OFs形态学特点一致。培养的OFs波形蛋白呈阳性反应,结蛋白、S-100、肌红蛋白和角蛋白均呈阴性反应。不同质量浓度IGF-1作用后TAO组和正常组OFs增生均呈逐渐上升趋势,总体比较差异有统计学意义(F分组=219.639,P<0.001;F质量浓度=17.752,P<0.001),以100 μg/L IGF-1的促进作用最强。0、50、100、125 μg/L IGF-1作用后TAO组OFs中IGF-1R表达量分别为(0.009 1±0.008 7)%、(0.095 3±0.023 3)%、(0.083 7±0.022 7)%和(0.070 9±0.024 1)%,正常组OFs中IGF-1R表达量分别为(0.002 3±0.000 6)%、(0.009 3±0.001 2)%、(0.007 3±0.001 5)%和(0.008 3±0.001 2)%,其中50、100和125 μg/L IGF-1作用后各组OFs中IGF-1R表达量均高于无添加IGF-1者,TAO组OFs细胞中IGF-1R的表达量均明显高于正常组,差异均有统计学意义(均P<0.05);0、50、100和125 μg/L IGF-1作用后TAO组和正常组OFs中TSHR表达量的总体比较差异均无统计学意义(F分组=0.133,P>0.05;F质量浓度=0.004,P>0.05)。

结论

IGF-1对TAO患者和正常人OFs的生长均有促进作用并能上调OFs中IGF-1R的表达,但其对OFs中TSHR的表达变化无明显影响。

引用本文: 代佳灵, 何为民, 罗梦绮. 胰岛素样生长因子-1对甲状腺相关眼病眼眶成纤维细胞的促生长作用 [J] . 中华实验眼科杂志, 2017, 35(9) : 805-810. DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2017.09.008.
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甲状腺相关眼病(thyroid associated ophthalmopathy,TAO)病理机制复杂,病因尚不十分清楚,目前认为眼眶成纤维细胞(orbital fibroblasts,OFs)是TAO发病的靶细胞和效应细胞[1,2]。研究表明促甲状腺激素受体(thyroid stimulating hormone receptor,TSHR)、胰岛素样生长因子-1受体(insulin-like growth factor-1 receptor,IGF-1R)等共同抗原的自身免疫反应在TAO发病过程中发挥重要作用[3,4,5]。但尚不十分清楚TAO患者眼眶组织中IGF-1水平的增高是否影响OFs上共同抗原的表达及其与疾病活动度的相关性。本研究探讨IGF-1对体外培养OFs增生的作用机制。

 
 
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