阐明腺苷受体拮抗剂SCH442416对体外加压的视网膜Müller细胞的钾离子通道的调控作用。
出生后5 d的SPF级SD大鼠30只，将大鼠的视网膜Müller细胞分离和培养，分为正常对照组(正常培养)、加压培养组[40 mmHg/24 h加压培养(1 mmHg＝0.133 kPa)]和腺苷＋SCH442416干预组(40 mmHg/24 h加压培养后加入10 μmol/L腺苷＋100 nmol/L SCH442416培养)。对大鼠视网膜Müller细胞体外加压40 mmHg/24 h培养，采用real-time PCR、Western blot等方法研究离体加压培养的视网膜Müller细胞的钾离子通道Kir2.1、Kir4.1和TASK-1的表达变化情况。体外加压培养的视网膜Müller细胞给予腺苷＋腺苷A2A受体拮抗剂SCH442416进行干预(药物终浓度为腺苷10 μmol/L＋ SCH442416 100 nmol/L)，检测视网膜及Müller细胞Kir2.1、Kir4.1和TASK-1的mRNA和蛋白的表达变化。
40 mmHg/24 h加压培养可致视网膜Müller细胞钾离子通道Kir2.1、Kir4.1和TASK-1的蛋白表达下调，与正常对照组相比分别下降了14.7%、38.6%和52.6%，2个组Kir2.1蛋白的表达差异无统计学意义(P＝0.082)，Kir4.1和TASK-1蛋白的表达差异均有统计学意义(P＝0.000、0.000)；腺苷＋ SCH442416干预组视网膜Müller细胞Kir2.1、Kir4.1和TASK-1的蛋白表达较加压培养组上调，分别上升了8.8%、60.7%和61.4%，2个组Kir2.1蛋白表达比较差异无统计学意义(P＝0.354)，2个组Kir4.1和TASK-1的蛋白表达比较，差异均有统计学意义(P＝0.000、0.000)。40 mmHg/24 h加压培养可致视网膜Müller细胞Kir2.1、Kir4.1和TASK-1 mRNA表达较正常对照组下调，差异均有统计学意义(P＝0.047、0.001、0.000)；与加压培养组相比，腺苷＋ SCH442416干预组Kir4.1和TASK-1的表达均上调，差异均有统计学意义(P＝0.038、0.030)，而Kir2.1的表达无明显变化，差异无统计学意义(P＝0.612)。
SCH442416对视网膜Müller细胞Kir4.1和TASK-1的蛋白和mRNA表达具有调控作用。
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青光眼视神经损害的确切机制尚未完全阐明，目前认为眼压升高所致视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells，RGCs)轴浆流受阻和机械压迫等因素导致的RGCs凋亡是其主要病理改变。既往青光眼视神经保护的研究主要集中在神经营养因子、一氧化氮合成代谢和自由基清除等方面，而关于青光眼视网膜微环境的研究，特别是离子及离子通道的研究很少。近年来，视网膜中Müller细胞等神经胶质细胞的结构和功能及其在生理及病理状态下对视网膜微环境的调控作用越来越受到重视。腺苷是中枢神经系统中一种重要的神经调质，Müller细胞通过钙离子依赖的方式分泌腺苷[1]。生理状态下细胞内外的腺苷浓度常低于1 μmol/L，应激情况下腺苷浓度大幅度上升，如炎症、缺血、缺氧、创伤、疼痛等。腺苷的广泛生物学效应主要由腺苷受体(adenosine receptor，AR)介导，目前已知的AR有A1、A2A、A2B和A3亚型，均属于G-蛋白偶联受体，可与相应的G蛋白结合，进而调节腺苷酸环化酶、离子通道和磷脂酶活性。有关心血管疾病和肾脏疾病的研究发现，腺苷对心肌细胞和肾基底膜细胞的钾离子通道具有调节作用，同时AR激动剂和拮抗剂用于中枢神经系统神经退行性病变，如帕金森病和阿尔茨海默病等的治疗也显示出良好的疗效[2,3]。本研究的目的在于阐明腺苷受体拮抗剂SCH442416对高眼压状态下视网膜Müller细胞钾离子通道的调控作用，为青光眼视神经保护研究提供理论依据和实验基础。
