研究在英国皇家外科学院(RCS)大鼠视网膜色素变性(RP)发展过程中，介导细胞免疫的T淋巴细胞和自然杀伤(NK)细胞及其分泌的细胞因子γ干扰素(IFN-γ)的变化。
选取出生后20日龄(P20)、P40、P60 RCS-rdy－-P＋大鼠(简称RCS大鼠)和相应日龄RCS-rdy＋-P＋大鼠(简称对照大鼠)各12只，细胞因子液相悬浮芯片检测大鼠视网膜匀浆中多种炎性细胞因子的质量浓度。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测各日龄大鼠视网膜中白细胞介素-2(IL-2)、CC类趋化因子配体2(CCL2)、CXC趋化因子配体9(CXCL9)、CXCL10和IFN-γ mRNA的表达水平；免疫组织化学技术检测大鼠视网膜中T淋巴细胞(CD4＋、CD8＋)和NK细胞(CD161＋)的分布；流式细胞术检测大鼠视网膜中T淋巴细胞(CD4＋、CD8＋)和NK细胞(CD161＋)的比例，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠视网膜组织匀浆中IFN-γ的质量浓度。
RCS组大鼠视网膜中淋巴细胞相关细胞因子和趋化因子mRNA表达水平均表现出随日龄增加而表达上调的趋势，P60 RCS大鼠视网膜中IL-2、CCL2、CXCL9、CXCL10、CXCL11和IFN-γ mRNA表达水平均较P20 RCS大鼠和对照组大鼠表达水平明显升高，差异均有统计学意义(均P<0.05)。P60 RCS大鼠视网膜中CD4、CD8、CD161细胞阳性率分别为(9.09±0.89)%、(18.77±0.38)%和(9.41±0.38)%。P60 RCS大鼠视网膜中IFN-γ阳性细胞比例为(8.29±0.27)%，较对照大鼠的(0.28±0.02)%显著升高，差异有统计学意义(t＝29.03，P＝0.00)。P60 RCS大鼠视网膜中CD4＋、CD8＋和CD161＋淋巴细胞主要分布在内层视网膜，且IFN-γ阳性标记与淋巴细胞表面标记呈共定位。不同日龄RCS大鼠和对照大鼠视网膜中IFN-γ质量浓度比较，差异均有统计学意义(F组别＝16.49，P<0.01；F时间＝21.05，P<0.01)，其中P60 RCS大鼠视网膜中IFN-γ质量浓度较P20 RCS大鼠、P40 RCS大鼠和对照组大鼠明显升高，差异均有统计学意义(均P<0.05)。
RCS大鼠RP改变了视网膜内相对免疫豁免的微环境，视网膜中淋巴细胞趋化因子和细胞因子表达水平逐渐升高，并在病变后期引起淋巴细胞的浸润和激活，导致IFN-γ在视网膜中浓度显著升高，表明细胞免疫参与其病理机制。
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在视网膜色素变性(retinitis pigmentosa，RP)的病理过程中，炎症和自身免疫反应具有极其重要的作用[1]。研究表明视网膜变性疾病的发生与血－视网膜屏障的破坏和免疫细胞的激活密切相关[2,3,4]，以往此类疾病的免疫学研究主要关注视网膜固有免疫细胞——小胶质细胞，本研究团队也通过大量动物实验证明小胶质细胞的激活可促进视网膜变性疾病的发展[5,6,7]。目前，关于眼内淋巴细胞的研究多集中于前房和葡萄膜[8,9]，淋巴细胞在RP病理过程中的具体作用鲜见报道，视网膜中淋巴细胞与外源性治疗细胞的关系仍处于干细胞转化医学研究的真空地带。英国皇家外科学院(Royal College of Surgeon，RCS)大鼠是RP模型大鼠，其遗传性受体酪氨酸激酶基因突变导致视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium，RPE)细胞吞噬感光细胞外节膜盘功能障碍，膜盘残余小体潴留于基底部细胞原浆中并向细胞外排出，特征表现为色素上皮层和Bruchs膜之间形成玻璃膜疣[10,11]。玻璃膜疣中大量自身抗原、氧化蛋白、模式识别受体等可活化抗原递呈细胞和补体系统，诱发视网膜中免疫细胞对感光细胞的攻击，促进视网膜变性疾病的发展[11,12]。其中，淋巴细胞作为机体获得性免疫的主要介导者，能识别抗原递呈细胞表面的眼自身抗原而被激活，受到趋化作用聚集于微环境中并引起一系列的免疫应答，破坏视网膜组织[13]。本研究中通过检测RCS大鼠视网膜微环境在变性不同阶段淋巴细胞相关细胞因子和趋化因子，以及淋巴细胞在变性视网膜组织中的分布和比例，探讨视网膜变性疾病与淋巴细胞的相互关系。
