比较不同药理批次重组诱饵型受体创新药物RC28-E的体外药效学，验证工艺变更前后生物治疗药物的效果是否存在差异。
将RF/6A细胞分为正常对照组、血管内皮生长因子(VEGF)＋成纤维细胞生长因子(FGF)组和不同质量浓度RC28-E1组，采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法筛选出RC28-E1最适作用浓度。将细胞分为正常对照组、VEGF＋FGF组、RC28-E1处理组、RC28-E2处理组、康柏西普处理组和FGF trap处理组，分别用无血清正常培养液、含VEGF＋FGF无血清培养液、含VEGF＋FGF＋RC28-E1无血清培养液、含VEGF＋FGF＋RC28-E2的无血清培养液、含VEGF＋FGF＋康柏西普无血清培养液以及含VEGF＋FGF＋FGF trap无血清培养液进行培养。采用CCK-8法检测各组细胞增生率；采用Transwell试验检测各组细胞迁移能力；采用Matrigel实验检测各组细胞管腔形成能力。
正常对照组、VEGF＋FGF组、0.025 mg/ml RC28-E1组、0.080 mg/ml RC28-E1组和0.240 mg/ml RC28-E1组细胞增生率总体比较差异有统计学意义(F＝6.601，P＝0.012)；其中0.080 mg/ml RC28-E1组细胞增生率明显低于VEGF＋FGF组，差异有统计学意义(P<0.05)，以0.080 mg/ml为RC28-E最适工作浓度。正常对照组、VEGF＋FGF组、RC28-E1处理组、RC28-E2处理组、康柏西普处理组、FGF trap处理组细胞增生率总体比较，差异有统计学意义(F＝3.210，P＝0.019)；其中RC28-E1处理组、RC28-E2处理组和FGF trap处理组的细胞增生率均明显低于VEGF＋FGF组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。各组移行细胞数目总体比较差异有统计学意义(F＝24.640，P＝0.000)；其中RC28-E1处理组、RC28-E2处理组、康柏西普处理组及FGF trap处理组移行细胞数均明显低于VEGF＋FGF组，差异均有统计学意义(均P＝0.000)；RC28-E2处理组移行细胞数少于RC28-E1处理组，差异有统计学意义(P＝0.002)。各组细胞管腔形成数总体比较，差异有统计学意义(F＝9.273，P＝0.000)，其中RC28-E1处理组、RC28-E2处理组、康柏西普处理组及FGF trap处理组内皮细胞管腔形成数均明显低于VEGF＋FGF组，差异均有统计学意义(P ＝ 0.003、0.001、0.009、0.018)；RC28-E2处理组细胞管腔形成数与正常对照组、RC28-E1处理组和康柏西普处理组相比，差异均无统计学意义(均P>0.05)；FGF trap处理组细胞管腔形成数明显高于RC28-E1处理组、RC28-E2处理组、康柏西普组及正常对照组，差异均有统计学意义(P＝0.014、0.000、0.008、0.014)。
在体外VEGF＋FGF刺激下，RC28-E对视网膜血管内皮细胞的增生抑制效果优于康柏西普，对管腔形成能力的抑制作用优于FGF trap。不同批次的重组诱饵型受体创新药物在视网膜血管内皮细胞中的效果无显著差异。
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病理性新生血管是糖尿病视网膜病变、早产儿视网膜病变、年龄相关性黄斑变性、视网膜中央静脉阻塞等眼病共同的病理改变；目前新生血管性视网膜疾病已成为发达国家首要的致盲眼病，中国以糖尿病视网膜病变、年龄相关性黄斑变性为主的眼底血管性疾病亦成为近年临床研究的热点[1,2,3,4]。研究表明，缺血、缺氧诱发的病理性视网膜新生血管管壁脆弱、渗透性增强，易破裂出血，进而机化牵拉引起视网膜脱离，从而致盲[5]。病理性新生血管的形成与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)和成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2，FGF2)等促血管生成因子的表达上调和/或活性增加有关[6,7,8,9]。因此，研发可同时拮抗VEGF和FGF2靶标的生物制剂，从而抑制新生血管产生，可作为新生血管性眼病的有效干预手段。荣昌生物制药(烟台)有限公司研发了具有自主知识产权的、可同时高亲和力和高特异性结合VEGF和FGF2的新型重组诱饵型受体RC28-E，其已在肿瘤和氧诱导视网膜病变小鼠模型中显示出拮抗新生血管的作用[8]。我们已在前期研究中完成了对药理批次药物(RC28-E1)在动物模型中的药效学检测及其作用机制的探索。为了应对后续临床试验及大规模、标准化生产，制药企业对RC28-E药物的制备工艺进行了相应的改进，获得中试批次药物(RC28-E2)。为了探究药理批次RC28-E1与中试批次RC28-E2药效是否存在差异，我们前期已在氧诱导视网膜病变小鼠模型和新生小鼠视网膜组织块中进行了RC28-E1和RC28-E2的药效学比较。为了完善该药物的药效学比较体系，本研究以临床上常用的药物康柏西普和FGF trap作为对照药，比较RC28-E1和RC28-E2对VEGF＋FGF双因子刺激下的猴视网膜血管内皮细胞增生、移行和管腔形成的直接作用效果，为后续临床试验和大规模生产提供实验基础。
