研究苦参碱对体外培养人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)增生和凋亡过程的影响。
复苏冻存的HTFs后进行培养、传代，取第3～4代细胞进行实验。用终质量浓度梯度为0、0.3、0.6、0.9 g/L苦参碱作用于体外培养的HTFs 24～72 h，采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测HTFs增生情况；采用流式细胞术检测HTFs的凋亡情况；采用Western blot法、实时荧光定量PCR法检测凋亡相关转录因子caspase-3的表达情况。
在梯度质量浓度苦参碱的作用下，HTFs的增生被抑制，且随时间的延长和质量浓度的增加，抑制效果更明显，差异均有统计学意义(F浓度＝1 019.51，P＝0.00；F时间＝5 848.66，P＝0.00；F交互作用＝147.45，P＝0.00)。0、0.3、0.6和0.9 g/L苦参碱作用后，HTFs的早期凋亡率分别为(2.68±0.30)%、(5.08±0.47)%、(6.97±0.69)%和(10.30±1.20)%，caspase-3蛋白表达的灰度值分别为1.00±0.13、1.90±0.19、2.50±0.30和2.67±0.30，caspase-3 mRNA的相对表达量分别为0.98±0.12、2.01±0.34、6.15±0.60和11.40±1.12，总体比较差异均有统计学意义(F＝55.74、66.01、154.50，均P<0.01)，随着苦参碱质量浓度的升高，HTFs的早期凋亡率明显升高，caspase-3蛋白、caspase-3 mRNA的相对表达量明显升高，各质量浓度组间两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。
苦参碱可抑制体外培养HTFs的增生，并呈剂量及时间依赖性；苦参碱可促进HTFs凋亡。
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人Tenon囊成纤维细胞(human Tenon capsule fibroblasts，HTFs)为存在于结膜下结缔组织的未分化间叶细胞[1]。青光眼滤过性手术后滤过道的瘢痕化是手术失败的主要原因，其主要特征之一是HTFs转化为肌成纤维细胞持续存在并产生大量的细胞外基质[2,3]。目前，术中应用抗增生药物，如丝裂霉素可以提高手术成功率，但由于其具有一定的毒性作用和不良反应，临床中对其使用有所限制。寻找既能有效防止滤过手术失败，又能有效抑制成纤维细胞增生的方法仍是青光眼研究的重点[4]。苦参碱作为豆科植物苦参的主要有效成分，对其他组织及器官纤维细胞的增生、胶原等成分的合成等具有明显抑制作用[5]，但其对HTFs的影响少有研究。本研究探讨苦参碱对HTFs增生、凋亡过程的影响，以期为青光眼滤过性手术的术中用药提供新的选择。
