研究疱疹病毒DNA在疱疹病毒阳性角膜移植患者不同角膜层次中的分布，比较角膜和房水样本在该人群中的病毒DNA检测效率。
采用诊断试验研究方法，通过临床病历系统收集2015年5月至2021年8月于北京大学第三医院眼科中心行角膜移植且术中角膜和/或房水疱疹病毒DNA阳性患者。分析疱疹病毒DNA阳性患者的一般资料和分布层次。计算疱疹病毒在角膜和房水中的检出率，通过受试者工作特征曲线分析角膜和房水病毒DNA检测灵敏度，记录曲线下面积(AUC)和95%置信区间(CI)。
角膜移植术中疱疹病毒DNA阳性患者共166例166眼，其中巨细胞病毒(CMV)75眼(占45.2%)，单纯疱疹病毒1型(HSV-1)34眼(占20.5%)，水痘－带状疱疹病毒(VZV)30眼(占18.1%)，EB病毒(EBV)27眼(占16.3%)。CMV和VZV DNA在角膜内皮层分布者分别为47眼(占62.7%)和26眼(占86.7%)，明显多于基质层的28眼(占37.3%)和4眼(占13.3%)，差异均有统计学意义(χ2＝4.813、16.133，均P<0.05)。HSV-1和EBV DNA在角膜内皮层分布者分别为8眼(占23.5%)和5眼(占18.5%)，分别少于基质层的26眼(占76.5%)和22眼(占81.5%)，差异均有统计学意义(χ2＝9.529、10.704，均P<0.001)。疱疹病毒DNA阳性样本的检测灵敏度结果显示，角膜样本的病毒PCR检测总体灵敏度为71.6%，高于房水的54.1%，其中，CMV和VZV DNA阳性的角膜样本检测灵敏度分别为64.3%(AUC＝0.821，95% CI：0.705~0.938)和35.7%(AUC＝0.679，95% CI：0.475~0.882)，分别低于房水样本的71.4%(AUC＝0.875，95% CI：0.750~0.964)和85.7%(AUC＝0.929，95% CI：0.816~1.000)。HSV-1和EBV DNA阳性的角膜样本检测灵敏度分别为100%(AUC＝1.000，95% CI：1.000~1.000)和92.3%(AUC＝0.962，95% CI：0.875~1.000)，明显高于房水样本的27.8%(AUC＝0.639，95% CI：0.455~0.823)和23.1%(AUC＝0.615，95% CI：0.395~0.835)。
在疱疹病毒DNA阳性的角膜移植患者中，CMV DNA的检出率最高，CMV和VZV DNA多在角膜内皮层被检出，HSV-1和EBV DNA多在角膜基质层被检出。相较房水样本，角膜组织病毒DNA的检测灵敏度更高。
版权归中华医学会所有。
未经授权，不得转载、摘编本刊文章，不得使用本刊的版式设计。
除非特别声明，本刊刊出的所有文章不代表中华医学会和本刊编委会的观点。
目前已知感染角膜组织的病毒多为疱疹病毒，包括1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus 1，HSV-1)、水痘－带状疱疹病毒(varicella-zoster virus，VZV)、巨细胞病毒(cytomegalovirus，CMV)和EB病毒(Epstein-Barr virus，EBV)，上述疱疹病毒可以分布于角膜任何层次，造成不同层次的角膜感染[1]。在既往研究中，HSV-1相关的角膜感染多见于角膜上皮层和基质层。有研究显示，在357例新发HSV角膜炎中，角膜上皮炎和基质炎分别占66%和30%[2]。HSV角膜内皮炎未见流行病学报道；VZV可以感染角膜各个层次，但常见于角膜基质炎和内皮炎[3,4]；CMV主要造成角膜内皮炎[5]，在亚洲人群中常见，日本一项研究显示，在29例病因未明的角膜内皮炎中，CMV DNA阳性率为24%[6]。CMV角膜上皮炎和基质炎仅有少量病例报道[7,8]；目前对EBV角膜感染知之甚少，仅在干燥性角结膜炎患者的泪液、角膜基质炎和角膜内皮炎的房水中检测到EBV DNA存在[5,9,10]。本课题组前期研究显示，在连续收集的44例病毒性角膜内皮炎患者中，CMV、HSV、VZV和EBV的占比分别为45%(20/44)、18%(8/44)、23%(10/44)和14%(6/44)[4]。当前，疱疹病毒性角膜炎的诊断主要依据临床症状和体征，例如HSV角膜上皮炎在特殊时期存在典型的树枝状或地图状角膜上皮缺损；VZV角膜基质炎表现为对应部位的基质混浊，通常发生在皮疹痊愈后；大多数CMV角膜内皮炎可见钱币状角膜后沉着物、局限性角膜水肿以及轻度前葡萄膜炎[11]。然而，一些不被人们熟知的疱疹病毒性角膜炎，如HSV角膜内皮炎、CMV角膜基质炎等往往无法通过临床特征诊断。实时荧光定量PCR是近年来广泛应用于眼部疱疹病毒感染的一种检测方法，该方法可以帮助诊断之前无法确诊病原体的病毒性角膜炎[12,13]。病毒DNA PCR检测可以帮助确定疱疹病毒种类[14]，从而明确诊断和调整用药。在疱疹病毒角膜炎的病毒DNA检测中，角膜和房水是2种常用的取材检测样本，在角膜移植患者中非常容易获取[13]。然而，对于非角膜移植患者，角膜通常难以获取，房水也需要进行前房穿刺才能获得，因其为有创操作，增加了眼部感染和出血的风险，很多患者不愿接受，因此经验性诊治仍然是目前的临床现状。然而，经验性治疗使得在抗病毒药物的选择上存在困难，往往贻误最佳治疗时机。本研究选取疱疹病毒DNA阳性的角膜移植患者，通过分析疱疹病毒DNA在角膜层次中的分布，比较角膜和房水样本在该人群中的病毒DNA检测效率，旨在提高临床疱疹病毒DNA的检出率，明确疱疹病毒性角膜炎的分类诊断，尽早开展合理治疗。
