张禄锴; 马剑雄; 赵杰; 匡明杰; 卢斌; 王颖; 孙磊; 马信龙

doi:10.3877/cma.j.issn.2096-0263.2018.01.002

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• 骨质疏松 •

唑来膦酸抑制RAW264.7细胞系分化的最佳浓度体外实验

中华老年骨科与康复电子杂志, 2018,04(1) : 4-8. DOI: 10.3877/cma.j.issn.2096-0263.2018.01.002

摘要

目的

观察唑来膦酸盐对RAW264.7细胞系毒性作用的浓度范围和抑制RAW264.7分化为破骨细胞的最佳实验浓度。

方法

以小鼠前破骨细胞系RAW264.7为研究对象，应用MTT法检测唑来膦酸盐对小鼠前破骨细胞系RAW264.7的毒性作用范围。使用TARP染色法观察不同浓度的唑来膦酸盐作用下破骨细胞的生成数目。

结果

体外培养24 h后，酶联免疫反应吸光度结果显示，10^-3 mol/L（0.511±0.920），10^-4 mol/L（0.615±0.577）唑来膦酸对小鼠前破骨细胞系RAW264.7增殖有毒性作用，与空白对照组（0.789±0.061）相比，差异有统计学意义（F=5.880，P<0.01）。TRAP染色破骨细胞计数结果显示：10^-5 mol/L（8.333±0.817）、10^-6 mol/L（10.400±1.817）、10^-7 mol/L（11.250±2.750）及10^-8 mol/L（11.143±1.864）唑来膦酸盐实验组破骨细胞数与空白对照组破骨细胞数（13.833±2.483）相比，差异具有统计学意义（F=27.972，P<0.05），且呈浓度依赖性，当唑来膦酸盐浓度为10^-5 mol/L时，抑制效果最明显（P<0.01）。

结论

唑来膦酸盐抑制RAW264.7细胞系分化为破骨细胞的最佳体外实验浓度为10^-5 mol/L。

引用本文: 张禄锴, 马剑雄, 赵杰, 等. 唑来膦酸抑制RAW264.7细胞系分化的最佳浓度体外实验 [J/OL] . 中华老年骨科与康复电子杂志, 2018, 04(1) : 4-8. DOI: 10.3877/cma.j.issn.2096-0263.2018.01.002.

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近年随着世界人口的老龄化，骨质疏松的患病率逐年升高并影响着众多人群的健康，目前已经成为全世界最关注的公共疾病之一^[1]。根据国内最新的研究报告显示我国目前大约共有1.4亿名骨质疏松患者，其中男性和女性骨质疏松患者每十年增长率分别为15%和20%，如何预防骨质疏松的发生，提高骨质疏松患者的骨骼强度是一个重要的急需解决的问题^[2]。

贡献者信息

张禄锴

300211　天津市天津医院骨科研究所；300193　天津中医药大学研究生院

马剑雄

300211　天津市天津医院骨科研究所

赵杰

300211　天津市天津医院骨科研究所

匡明杰

300211　天津市天津医院骨科研究所

卢斌

300211　天津市天津医院骨科研究所

王颖

300211　天津市天津医院骨科研究所

孙磊

300211　天津市天津医院骨科研究所

马信龙

300211　天津市天津医院骨科研究所；300142　天津市天津医院

通信作者

马信龙

300211　天津市天津医院骨科研究所；300142　天津市天津医院

Email：ZLMM10@163.com

关键词

唑来膦酸; 破骨细胞; 细胞分化; 细胞毒性; RAW264.7;

基金项目

国家自然科学基金项目（81572154）

吴阶平医学基金会临床科研专项资助项目（320.6750.15185）

天津市卫生局科技攻关项目（15KG123）

作者声明

张禄锴,马剑雄,赵杰,等.唑来膦酸抑制RAW264.7细胞系分化的最佳浓度体外实验[J/CD].中华老年骨科与康复电子杂志, 2018, 4(1): 4-8.

历史

出版日期：2018-02-05

收稿日期：2017-04-01

本文编辑

吕红芝

Osteoporosis

Effects and optimum concentration of zoledronate on RAW264.7

Lukai Zhang, Jianxiong Ma, Jie Zhao, Mingjie Kuang, Bin Lu, Ying Wang, Lei Sun, Xinlong Ma

Published 2018-02-05

Cite as Chin J Geriatr Orthop Rehabil(Electronic Edition), 2018, 04(1): 4-8. DOI: 10.3877/cma.j.issn.2096-0263.2018.01.002

Abstract

Objective

To further observe the concentration range of zoledronate on RAW264.7 cell toxic effect and confirm the optimum concentration in inhibition of RAW264.7 differentiation of osteoclast.

Methods

Mouse leukemia macro phage RAW264.7 was cultured as research object. RAW264.7 osteoclast toxic effect of zoledronate was detected by MTT method. Inhibition of osteoclast differentiation by different concentration of zoledronate were detected by tartrate-resistant acid phosphatase staining method.

Results

After 24 h vitro culture, Enzyme-linked immunosorbent assay absorbance indicated that 10^-3 mol/L (0.511±0.920), 10^-4 mol/L (0.615±0.577) concentrations of zoledronate had significantly toxic effects on cells compared with the blank control group (0.789±0.061)(F=5.880, P<0.01). TRAP staining osteoclast count indicated that 10^-5 mol/L (8.333±0.817), 10^-6 mol/L (10.400±1.817), 10^-7 mol/L (11.250±2.750) and 10^-8 mol/L (11.143±1.864) concentrations of zoledronate all significantly inhibited RAW264.7 differentiation compared with the blank control group (F=27.972, P<0.05), showing concentration dependence, 10^-5 mol/L zoledronate had the highest inhabitation effect (P<0.01).

Conclusion

Zoledronate can effectively inhibit RAW264.7 differentiation, and the optimum concentration in vitro is 10^-5 mol/L.

Key words:

Zoledronic acid; Osteoclast; Cell differentiation; Cytotoxicity; RAW264.7

Contributor Information

Lukai Zhang