监测与检测技术
血中N-[4-(4-氨基苄基)-苯基]乙酰胺血红蛋白加合物的超高效液相色谱-串联质谱测定法
中华劳动卫生职业病杂志, 2020,38(10) : 772-776. DOI: 10.3760/cma.j.cn121094-20200114-00022
摘要
目的

建立血中二苯基甲烷二异氰酸酯(MDI)代谢产物N-[4-(4-氨基苄基)-苯基]乙酰胺(AcMDA)血红蛋白加合物的超高效液相色谱-串联质谱测定方法。

方法

准确称取20 mg血红蛋白样品置于15 ml离心管中,加入10 μl 20 μg/L AcMDA-D8内标溶液,再加入1 ml 0.1 mol/L氢氧化钠溶液在37 ℃下水解0.5 h,经二氯甲烷液液萃取后,真空浓缩至近干,乙腈复溶后超高效液相色谱-串联质谱测定,内标标准曲线法定量。

结果

该方法线性范围为0.01~25.00 μg/L,相关系数为r=0.999 6。方法的检出限和定量下限分别为0.07和0.2 ng/g Hb;方法的加标回收率为91.0%~95.4%;批内精密度为4.5%~6.3%,批间精密度为3.7%~4.4%。

结论

该方法的各项技术指标符合GBZ/T 210.5-2008《职业卫生标准制定指南第5部分:生物材料中化学物质测定方法》的要求。

引用本文: 王小康, 李海斌, 闫慧芳. 血中N-[4-(4-氨基苄基)-苯基]乙酰胺血红蛋白加合物的超高效液相色谱-串联质谱测定法 [J] . 中华劳动卫生职业病杂志, 2020, 38(10) : 772-776. DOI: 10.3760/cma.j.cn121094-20200114-00022.
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二苯基甲烷二异氰酸酯(MDI)是目前用量大、用途广的异氰酸酯类物质,广泛用于板材、家具、汽车制造和医疗等诸多领域[1]。MDI有致敏作用,可引发支气管哮喘,是职业性哮喘的主要致病因素。长期低剂量接触MDI可引起肺功能受损,并影响机体免疫系统[2,3],MDI具有一定的遗传毒性和生殖发育毒性[4]。有研究发现,MDI在代谢过程中形成的血红蛋白(Hb)加合物可反映其综合接触的水平,适用于长期接触的监测指标[5]。MDI与Hb主要形成二氨基二苯基甲烷(MDA)-Hb、N-[4-(4-氨基苄基)-苯基]乙酰胺(AcMDA)-Hb和5-异丙基-3-[4-(4-氨基苄基)苯基]乙内酰脲(ABP-Val-Hyd)-Hb三种加合物[6,7,8],AcMDA-Hb可以作为体内MDA生物利用度的证据[7]。AcMDA-Hb在一定的水解条件下生成AcMDA,目前多采用气相色谱高分辨率质谱(GC-MS/MS)联用技术测定AcMDA[6,7]。德国科学研究联合会制订的MDI生物耐受限值(BAT)为班末尿中4,4'-MDA浓度10 μg/g肌酐[9],我国目前尚未制定MDI相应的生物监测指标和生物接触限值。我们建立血中MDI代谢产物AcMDA的超高效液相色谱-串联质谱测定方法,为接触MDI人群的接触评估以及MDI生物接触限值的制定提供技术支持。

 
 
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