基础研究
转录因子SOX5在类风湿关节炎患者中的表达及意义
中华风湿病学杂志, 2019,23(1) : 46-51. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-7480.2019.01.010
摘要
目的

探讨转录因子SOX5在RA患者PBMCs及血清中的表达及其意义。

方法

招募南京医科大学第一附属医院风湿免疫科RA患者30例,OA患者27例和健康对照组(HC)30名。采用实时荧光定量(RT)-PCR检测SOX家族基因在RA患者PBMCs中相对表达量及3组PBMCs中SOX5表达,ELISA法检测3组血清中SOX5表达水平。运用RT-PCR检测分别使用IL-6、TNF-α、IL-1β及IL-17刺激PBMCs 24 h后,SOX5表达水平差异。免疫共沉淀实验(co-IP)法分析SOX5与核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的相互作用。采用RNA干扰技术沉默小鼠破骨前体细胞系RAW264.7中SOX5表达,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察其对RANKL诱导破骨细胞分化的影响。多组间比较采用单因素方差分析,运用Pearson检验进行相关性分析。

结果

在检测的SOX基因家族8个基因中,RA患者PBMCs中以D亚家族的SOX5优势表达为主。RA组、OA组和健康对照组PBMCs中SOX5相对表达量分别为(21±19)、(10±8)、(5±4),RA组与OA组、健康对照组差异有统计学意义(F=8.343,P<0.01);RA组、OA组和健康对照组血清中SOX5平均水平分别为(19 132±12 054)pg/ml、(9 065±15 172)pg/ml和(3 242±1 251)pg/ml,RA组与OA组、健康对照组差异有统计学意义(F=15.31,P<0.01)。IL-6、TNF-α、IL-1β及IL-17可促进PBMCs中SOX5基因的表达。co-IP显示IL-6、TNF-α及IL-1β可促进SOX5与RANKL结合。采用SOX5-siRNA转染RAW264.7沉默SOX5表达后,RANKL诱导破骨细胞分化数量显著减少。

结论

RA患者PBMCs及血清中转录因子SOX5表达显著上调,可能通过调控RANKL基因表达,影响破骨细胞分化,参与RA发病过程。靶向抑制SOX5表达,可能成为治疗RA的新方法。

引用本文: 吴琴, 石雨濛, 骆爱姝, 等.  转录因子SOX5在类风湿关节炎患者中的表达及意义 [J] . 中华风湿病学杂志, 2019, 23(1) : 46-51. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-7480.2019.01.010.
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RA是最常见的自身免疫病之一,以慢性滑膜炎和骨侵蚀为主要病理特征[1]。尽管RA病理机制尚不十分明确,破骨细胞的过度分化和激活是导致RA骨侵蚀的关键因素之一。TNF受体超家族成员-核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor κB ligand,RANKL)是近年来发现的最重要的调节破骨细胞分化激活的因子之一[2]。本课题组既往在RANKL基因启动子区发现一个新的RA易感位点,并证实该位点突变后是转录因子SOX5在RANKL基因上的结合区域[3],携带该突变位点RA患者比未携带者平均早发病10~13年。SOX5基因属于SOX基因家族中D亚家族成员,既往关于SOX5的研究主要集中在其对精子发育和软骨组织中的作用[4]。现有研究发现,SOX5基因是多发性硬化症患者外周血中表达水平上调最明显的转录因子之一[5],且SOX5可能正向参与调控了SLE的免疫应答[6]。SOX5在免疫疾病中的作用正逐步引起人们的关注,但目前关于SOX5在RA中的表达和作用机制尚未见报道。我们既往研究发现RA患者滑膜组织中SOX5高表达[7],本研究主要通过实时荧光定量(real-time,RT)-PCR、ELISA,免疫共沉淀实验(co-Immunoprec-ipitation,co-IP)等实验检测RA患者PBMCs及血清中SOX5的表达情况及可能作用机制。

 
 
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