应用技术
狂犬病病毒CVS-11攻毒小鼠动物模型的建立及初步应用
中华微生物学和免疫学杂志, 2020,40(4) : 300-304. DOI: 10.3760/cma.j.cn112309-20190919-00304
摘要
目的

建立狂犬病病毒CVS-11以肌肉注射或脑内注射方式攻毒的BALB/c小鼠动物模型。

方法

将由BSR细胞传代繁殖的滴度为2.7×107 FFU/ml的CVS-11毒株进行10-1~10-7倍系列稀释,分别以肌肉或脑内注射的方式对4周龄的雌性BALB/c小鼠进行攻毒,观察小鼠发病死亡情况,并对所有攻毒小鼠的脑组织进行直接免疫荧光试验(direct fluorescent assay, DFA)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测以确定小鼠死因。确定不同攻毒方式下小鼠的半数致死量(median lethal dose,LD50),建立小鼠模型。根据已建立的小鼠模型,评估4种国内市售狂犬病疫苗对CVS-11暴露后小鼠的免疫保护效果。

结果

BALB/c小鼠脑内攻毒后于第6~12天开始出现典型的神经症状并死亡,其LD50为18.3/0.1 ml;肌肉注射攻毒的小鼠在第8~15天出现临床症状并死亡,LD50为2.7×105/0.1 ml。DFA检测结果显示,所有死亡小鼠脑组织印片中均出现特异性黄绿色荧光,RT-PCR检测结果显示所有的扩增产物均出现大小约250 bp的明亮条带。以上结果提示狂犬病病毒感染是小鼠的致死原因。4种不同的市售狂犬病疫苗在无免疫球蛋白应用情况下的保护效果试验显示,接种其中1种疫苗暴露后小鼠的存活率为50%,接种其他3种疫苗小鼠的存活率为30%。以上结果表明,在无狂犬病被动免疫制剂使用的情况下,所选用的4种狂犬病疫苗对经CVS-11暴露后的小鼠提供了部分保护作用。

结论

本研究建立了狂犬病病毒CVS-11不同攻毒方式下的BALB/c小鼠动物模型,为狂犬病及狂犬病疫苗的相关研究提供了一个技术平台。

引用本文: 宋云, 于鹏程, 朱武洋. 狂犬病病毒CVS-11攻毒小鼠动物模型的建立及初步应用 [J] . 中华微生物学和免疫学杂志, 2020, 40(4) : 300-304. DOI: 10.3760/cma.j.cn112309-20190919-00304.
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狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)感染引起的一种人畜共患传染病,临床表现大多为特异性恐风、恐水、咽肌痉挛、进行性瘫痪等。狂犬病病毒根据其毒力不同分为街毒(street rabies virus)和固定毒(fixed rabies virus)两种类型。直接从自然界分离到的狂犬病病毒称为街毒,街毒具有很强的嗜神经性,在自然情况下感染机体后,病毒通过肌肉-神经接头或神经传感器侵入外周神经,感染后引起严重的神经系统异常症状和脑脊髓炎[1,2,3]。固定毒是街毒经过多次动物或细胞传代后得到的潜伏期稳定的病毒株,它们的神经侵袭力和神经趋向性大大降低,通过外周感染的方式进入中枢神经系统。固定毒感染后能引发机体产生强烈的固有或适应性免疫应答,保护机体抵抗病毒的侵害[4,5]

 
 
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