探讨血清甲胎蛋白（AFP）、α-L-岩藻糖苷酶（AFU）、5'-核苷酸酶（5'-NT）和γ-谷氨酰转肽酶（GGT）检测在肝细胞癌（HCC）诊断中的应用，为HCC早期、快速诊断提供依据。
回顾性分析2013年6月至2014年10月首诊为HCC的患者120例（HCC组）、肝硬化患者150例（肝硬化组）、肝炎患者200例（肝炎组），同时选择同期健康体检者100例作为健康对照组。分别采用电化学发光法、速率法、过氧化物酶法和酶比色法测定血清AFP、AFU、5'-NT和GGT水平，绘制受试者工作特征（ROC）曲线，计算灵敏度、特异度及曲线下面积（AUC）。
HCC组、肝硬化组、肝炎组和健康对照组血清AFP、AFU、5'-NT和GGT的水平两两比较差异均有统计学意义（均P<0.05）。AFP、AFU、5'-NT和GGT单独检测HCC的灵敏度分别为58.33 %（70/120）、82.50 %（99/120）、85.00 %（102/120）、78.33 %（94/120），特异度分别为88.33 %（106/120）、73.33 %（88/120）、88.33 %（106/120）、71.67 %（86/120），AUC分别为0.655、0.702、0.814、0.754，四项指标联合检测HCC的灵敏度为98.33 %（118/120），特异度为96.67 %（116/120），AUC为0.975，均较单项检测高（均P<0.05）。
血清AFP、AFU、5'-NT和GGT联合检测可提高HCC诊断的灵敏度和特异度，能够优势互补，对HCC的早期和快速诊断具有重要的临床意义。
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肝细胞癌（HCC）是消化系统常见的恶性肿瘤之一，居肿瘤致死病因的第3位[1,2]。其具有病程进展快、恶性程度高、预后差等特点[3]。目前临床上常用肿瘤体征、体能状况、肝功能状态等指标对HCC进行综合判断，但时效性、准确性相对较差[4]。而血清甲胎蛋白（AFP）虽然是临床上诊断及筛查HCC最常用的肿瘤标志物，但灵敏度极低[5]，作为早期HCC的诊断及筛查指标并不理想[6]。α-L-岩藻糖苷酶（AFU）和γ-谷氨酰转肽酶（GGT）的表达与HCC密切相关[7]，且具有较高的灵敏度，但特异度较差。而5'-核苷酸酶（5'-nucleotidase，5'-NT）在诊断HCC方面具有极高的灵敏度[8]。因血清标志物联合检测能够提高诊断的阳性率[9]，故本研究旨在探讨AFP、AFU、5'-NT和GGT联合检测在HCC诊断中的临床应用。
选择2013年6月至2014年10月我院感染性疾病诊疗中心和肿瘤内科收治的住院患者470例，其中原发性HCC 120例（HCC组）、肝硬化150例（肝硬化组）、肝炎200例（肝炎组）。HCC组中，男性78例，女性42例；年龄13~78岁，平均年龄（58±11）岁。肝硬化组中，病毒性肝炎肝硬化145例，酒精性肝硬化2例，胆汁淤积性肝硬化2例，自身免疫性肝硬化1例；男性92例，女性58例；年龄12~80岁，平均年龄（57±13）岁。肝炎组中，乙型肝炎155例，丙型肝炎44例，自身免疫性肝炎1例；男性136例，女性64例；年龄9~78岁，平均年龄（56±12）岁。同时选择健康体检者100名为健康对照组，包括男性62例，女性38例，年龄7~73岁，平均年龄（55±11）岁。各组间性别构成比、年龄等基础资料比较差异均无统计学意义（均P>0.05）。本研究已获我院伦理委员会审核批准，所有受试者均自愿参加并签署书面知情同意书。
HCC的诊断依据中国抗癌协会肝癌专业委员会2001年修订的《肝细胞癌的诊断与分期标准》[10]。肝硬化的诊断符合中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会2000年联合修订的《病毒性肝炎防治方案》[11]。肝炎的诊断符合中华医学会肝病学分会《慢性乙型肝炎诊断标准》（2010年版）和《病毒性肝炎防治方案》（2000年版）[11,12]。健康体检者均排除心、脑、肺、肝、肾、胰、脾等器官疾病及基础疾病，肝功能、肝炎标志物检查、腹部B型超声、查体等检查提示健康。
抽取受试者清晨空腹静脉血5 ml，置于一次性真空采血管（上海科华检验医学产品有限公司），在室温下自然凝集30 min，相对离心力2 264×g离心15 min，分离血清，将获得的血清置于-20 ℃冰箱中保存待测。标本应避免脂血、溶血。
AFP检测采用电化学发光法，试剂、质控物及校准品均为瑞士罗氏公司产品，仪器为罗氏e601全自动电化学发光免疫分析仪。5'-NT检测采用过氧化物酶法，试剂和校准品均由北京九强生物技术股份有限公司提供，质控物由英国朗道公司提供。GGT检测采用酶比色法，试剂和校准品cfas均由瑞士罗氏公司提供，质控品由英国朗道公司提供。所有操作严格按仪器SOP文件和试剂使用说明书进行。
采用SPSS 13.0软件对数据进行处理，计量资料以均数±标准差（
±s）表示，多组间计量资料的比较采用方差分析，两两比较采用SNK-q检验；计数资料的比较采用χ2检验；受试者工作特征曲线（ROC曲线）下面积（AUC）分析采用Medcalc软件。以P<0.05为差异有统计学意义。
各组间AFP、AFU、5'-NT和GGT水平差异均有统计学意义（均P<0.05）（表1）。
不同肝脏疾病患者和健康对照者血清AFP、AFU、5'-NT和GGT水平比较（
±s）
不同肝脏疾病患者和健康对照者血清AFP、AFU、5'-NT和GGT水平比较（±s）
| 组别 | 例数 | AFP（ng/ml） | AFU（U/L） | 5'-NT（U/L） | GGT（U/L） |
|---|---|---|---|---|---|
| 肝细胞癌组 | 120 | 433.52±118.34 | 84.26±24.40 | 114.68±46.25 | 362.88±79.61 |
| 肝硬化组 | 150 | 286.32± 71.62 | 46.23±18.12 | 78.49±25.31 | 244.92±58.35 |
| 肝炎组 | 200 | 88.38± 29.74 | 28.25±12.04 | 24.82±11.02 | 135.46±38.27 |
| 健康对照组 | 100 | 4.21± 1.26 | 13.20± 5.17 | 3.25± 1.28 | 15.21± 4.28 |
| F值 | 64.22 | 24.12 | 47.60 | 29.32 | |
| P值 | 0.000 | 0.000 | 0.000 | 0.000 |
注：AFP为甲胎蛋白；AFU为α-L-岩藻糖苷酶；5'-NT为5'-核苷酸酶；GGT为γ-谷氨酰转肽酶
四项指标联合检测的灵敏度、特异度和AUC均较单项检测高（均P<0.05）（表2、图1）。
各标志物单项及联合检测对肝细胞癌（120例）诊断的效能比较[%（例）]
各标志物单项及联合检测对肝细胞癌（120例）诊断的效能比较[%（例）]
| 标志物 | 灵敏度 | 特异度 | AUC |
|---|---|---|---|
| AFP | 58.33（70） | 88.33（106） | 0.655 |
| AFU | 82.50（99） | 73.33（88） | 0.702 |
| 5'-NT | 85.00（102） | 88.33（106） | 0.814 |
| GGT | 78.33（94） | 71.67（86） | 0.754 |
| 四项联合 | 98.33（118） | 96.67（116） | 0.975 |
注：AUC为曲线下面积；AFP为甲胎蛋白；AFU为α-L-岩藻糖苷酶；5'-NT为5'-核苷酸酶；GGT为γ-谷氨酰转肽酶
AFP：甲胎蛋白；AFU：α-L-岩藻糖苷酶；GGT：γ-谷氨酰转肽酶；5'-NT：5'-核苷酸酶
原发性HCC作为我国消化系统常见的恶性肿瘤，其发病率和病死率居世界之首，每年约有11万人死于HCC[13]。HCC具有病程进展快、恶性程度高、预后差等特点，早期诊断是HCC治疗及提高患者生命质量的前提条件。目前，HCC的诊断主要依据病理组织切片检验结果，虽可确诊，但不适于普查。在HCC早期诊断中，我们同时应用AFP、AFU、5'-NT和GGT四项肿瘤标志物，探讨四者联合检测对HCC早期诊断的价值。
AFP是目前临床上最常用于诊断原发性HCC的肿瘤标志物。但在肝脏良性疾病中，尤其是肝硬化中AFP可出现一过性增高[13]，易出现假阳性。此外，AFP水平与肿瘤体积、分化程度、生长情况、变化坏死及其生物学特性有关[14]，影响因素较多。本研究结果显示，AFP水平虽然在HCC组、肝硬化组、肝炎组及健康对照组间差异有统计学意义（P<0.05），对HCC诊断的特异度很高（88.33 %），但灵敏度极低，仅为58.33 %，作为早期诊断指标并不适合。AFP诊断HCC的AUC为0.655，诊断的准确度较低，单凭AFP来诊断HCC易造成误诊和漏诊。
AFU是一种溶酶体酸性水解酶，广泛存在于人体各种组织细胞溶酶体和体液中，主要参与含岩藻糖基的各种糖脂、糖蛋白等大分子物质的代谢。当肝脏发生病变时，AFU合成增加，外周血中AFU浓度急剧增高。本研究显示，HCC组AFU水平高于肝硬化组、肝炎组及健康对照组（P<0.05），表明该指标对四类疾病的诊断及鉴别诊断具有良好的预测价值，与Tangkijvanich等[15]的研究结果一致。其较高的敏感度（82.50 %）也可弥补AFP漏诊的不足。其AUC为0.702，亦高于AFP，表明其诊断的准确度较AFP高。
5'-NT是一种特殊的磷酸水解酶，以肝脏中的含量最为丰富。当肝细胞内质网的膜结构发生破坏时，线粒体会发生退行性改变甚至消失，合成机制发生障碍造成肝细胞结构受损，导致患者体内5'-NT的含量增高。据何洁文和王勋松[16]报道，5'-NT的变化较少受肝外其他疾病的影响。因此，检测血清5'-NT对HCC的诊断具有重要临床价值。本研究显示，5'-NT水平在HCC组、肝硬化组、肝炎组及健康对照组间差异有统计学意义（P<0.05），其敏感度为85.00 %，较AFP、AFU、GGT单项均高，可弥补其他指标灵敏度低的不足，适合于HCC的早期诊断。5'-NT ROC曲线位于其他单项指标的左上方，AUC为0.814，表明其诊断HCC的准确度优于其他三项指标。
GGT是一种质膜结合糖蛋白，主要在肝、肾、胰、肠等组织中表达。HCC患者因肝内阻塞可导致肝细胞产生大量GGT，从而引起血清GGT升高。本研究发现，GGT水平在HCC组、肝硬化组、肝炎组和健康对照组间差异具有统计学意义（P<0.05），由此推断，GGT的水平变化与肝病的病程及严重程度相关，可用于HCC的辅助诊断及鉴别诊断。GGT诊断HCC的灵敏度为78.33 %，较AFP高，但低于5'-NT和AFU，特异度最低，仅为71.67 %，AUC为0.754，表明该指标在早期诊断方面优于AFP，但不及AFU和5'-NT。
总之，本研究结果表明，AFP、AFU、5'-NT和GGT联合检测诊断HCC的灵敏度、特异度、AUC分别为98.33 %、96.67 %和0.975，均高于单项检测。因此，四者联合检测诊断HCC既可降低误诊率，又可降低漏诊率，做到优势互补，且检测方法简便、快速、准确，在HCC诊断方面具有极大的临床价值，有望成为临床上早期诊断及鉴别诊断HCC的一个新方法，值得推广。
无
