检测T-2毒素和硒对软骨不同分化层细胞增殖的影响，为大骨节病软骨损伤研究提供依据。
用分化培养基（常规培养液含1% ITS）分别诱导鼠软骨前体细胞系ATDC5 0、7、14、21 d，实时荧光定量PCR (Real-Time PCR）检测胶原蛋白Ⅱ （Col Ⅱ）、胶原蛋白X (Col X）的mRNA水平，确定其处于软骨不同分化层；T-2毒素（含量分别为1、5、10、20、50、100 μg/L）和T-2毒素＋硒（0.1 mg/L）分别作用于ITS诱导0、7、14、21 d的ATDC5细胞24、48 h，噻唑蓝（MTT）法检测T-2毒素和硒对软骨不同分化层细胞增殖的影响。
ITS诱导ATDC5细胞14、21 d，软骨细胞Col Ⅱ mRNA （10.73 ± 4.55、3.16 ± 0.19）均高于0 d (1.00 ± 0.00，P均< 0.05）；ITS诱导ATDC5细胞21 d，软骨细胞Col X mRNA (49.21 ± 9.54）显著高于0 d (1.00 ± 0.00，P < 0.05）。低含量T-2毒素（1、5、10 μg/L）作用不同分化层细胞24 h出现代谢性补偿现象刺激细胞增殖，作用48 h无代谢补偿现象；中高含量T-2毒素（20、50、100 μg/L）作用不同分化层细胞24、48 h, T-2毒素对21 d细胞的抑制率[24 h：（13.92 ± 2.47）%、（47.78 ± 4.22）%、（67.24 ± 2.48）%，48 h：（15.84 ± 2.85）%、（55.31 ± 0.50）%、（70.89±9.88）%]均低于0 d[24 h：（38.46 ± 6.14）%、（53.20 ± 6.20）%、（73.94 ± 1.93）%，48 h：（74.83 ± 1.80）%、（88.98 ± 1.51）%、（92.68 ± 0.42）%]、7 d [24 h：（24.15 ± 1.27）%、（45.19 ± 1.29）%、（71.79 ± 0.94）%，48 h：（47.91 ± 4.71）%、（77.84 ± 0.52）%、（89.41 ± 0.52 ）%]、14 d [24 h：（25.87 ± 5.41）%、（62.50 ± 2.50）%、（75.34 ± 1.81）%，48 h：（59.53 ± 1.13 ）%、（80.32 ± 4.54）%、（95.22 ± 1.22）%，P均< 0.05 ]。T-2毒素＋硒作用不同分化层细胞48 h，中高含量T-2毒素（20、50、100 μg/L）＋硒时，T-2毒素对21 d细胞的抑制率[（13.60 ± 0.50）%、（50.76 ± 6.99）%、（82.54 ± 2.52）%]均低于0 d [（72.65 ± 5.80）%、（88.92 ± 0.70）%、（90.32 ± 2.20）%]、7 d [（38.69 ± 1.96）%、（75.75 ± 0.22）%、（86.90 ± 1.91）%]、14 d [（77.90 ± 2.20）%、（94.11 ± 0.42）%、（94.10 ± 0.46）%，P均< 0.05]。
ITS诱导21 d, ATDC5细胞对T-2毒素的敏感性低于其他不同分化层细胞，加硒后对T-2毒素的敏感性仍低于其他不同分化层细胞；提示T-2毒素有可能通过骨髓等其他途径损伤深层软骨细胞，为大骨节病软骨层坏死的机制提供了新的线索。
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大骨节病（Kashin-Beck disease, KBD）是一种以损害人类发育过程中软骨内化骨型的透明软骨，并导致软骨内化骨障碍的地方性、继发性畸形性骨关节病[1]。国内外学者提出各种KBD环境病因假说[2,3,4,5]，如低硒学说、粮食真菌毒素污染学说和饮水中有机物中毒学说等，但其具体致病机制仍不清楚。前期研究发现，低硒条件下T-2毒素可致大鼠关节软骨深层发生KBD类似的病理改变，而病变关节的表中层正常，提示低硒条件下T-2毒素中毒与KBD的病因学关系[6]。T-2毒素和低硒复合为何只是致关节软骨的深层细胞坏死或是为何先致关节软骨深层细胞坏死呢？推测有两种可能：一是由于软骨细胞各层对T-2毒素的敏感性不同，以及硒对软骨细胞不同分化层的保护作用不同；二是T-2毒素通过特殊途径首先到达软骨细胞深层。鼠软骨前体细胞系ATDC5细胞，在胰岛素存在的条件下可模拟软骨不同分化阶段的静止层、增殖层、肥大层[7]。本实验以ATDC5细胞为研究对象，通过研究T-2毒素和硒对软骨不同分化层细胞增殖的影响，为了解KBD软骨深层坏死的机制提供新的线索与依据。
