
通过检测RNA结合蛋白人抗原R(HuR)与脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4)、脂肪酸合成酶(FASN)、脂蛋白脂肪酶(LPL)在人脂肪细胞分化过程中的表达变化,并探讨其作用。
对人脂肪源性间充质干细胞进行成脂诱导分化,油红O染色观察细胞成脂情况,分别以实时定量PCR和Western印迹检测HuR、FABP4、FASN、LPL mRNA和蛋白表达水平的变化;siRNA干扰HuR后,进一步观察细胞成脂变化和成脂相关基因的表达水平。
人脂肪源性间充质干细胞在成脂诱导分化过程中HuR、FABP4、FASN和LPL的mRNA和蛋白质的表达水平均显著升高(均P<0.01)。干扰HuR表达后,细胞成脂水平干扰组较对照组下降,FABP4、FASN、LPL mRNA表达水平无明显变化,而其蛋白表达水平均显著下调(均P<0.05)。
HuR主要通过调节FABP4、FASN和LPL蛋白水平的变化影响成脂,促进人脂肪细胞的分化。
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肥胖症是指机体摄入能量多于消耗,导致体内脂肪过多堆积和(或)分布异常,从而引起体重增加的一种多因素慢性代谢性疾病。超重和肥胖与许多慢性病(如心血管病、糖尿病等)密切相关,是冠心病和缺血型脑卒中的独立危险因素[1,2,3,4,5],而脂肪细胞的异常分化是导致肥胖的重要原因之一[6,7]。脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding protein type 4,FABP4)属于脂肪酸结合蛋白大家族,是成熟脂肪细胞的重要标志蛋白,FABP4的主要生理功能是参与细胞内脂肪酸的转运和靶向定位,促进脂肪细胞的分化[8,9,10]。脂肪酸合成酶(fatty acid synthetase,FASN)是促进机体组织脂肪酸合成的主要限速酶。脂蛋白脂肪酶(lipoprotein lipase,LPL)是供给肌肉和脂肪组织未酯化的脂肪酸的限速酶,与肥胖的发生密切相关[11]。因此,FABP4、FASN和LPL均在在脂肪细胞分化中发挥着十分重要的作用。人抗原R(human antigen R,HuR)为RNA结合蛋白,可通过与靶基因末端富含腺嘌呤和尿嘧啶的序列结合,增强mRNA的稳定性和调节蛋白翻译[12,13]。本研究选取人脂肪源性间充质干细胞,检测在定向成脂诱导分化中HuR干扰前后对FABP4、FASN和LPL基因表达水平和诱导分化的影响,探索HuR与FABP4、FASN和LPL可能存在的调控关系,对肥胖及相关疾病发病机制研究具有重要意义。

























