疫苗研究
规模化生产中实际感染复数对轮状病毒增殖的影响
国际生物制品学杂志, 2023,46(2) : 86-89. DOI: 10.3760/cma.j.cn311962-20220623-00033
摘要
目的

探索轮状病毒疫苗规模化生产中实际感染复数(multiplicity of infection,MOI)对病毒增殖的影响。

方法

用荧光灶试验方法检测接种Vero细胞的轮状病毒接种液的病毒滴度,实际MOI即为接种液病毒数量除以细胞数量。通过致细胞病变的天数及单次病毒收获液的滴度反映规模化生产中实际MOI对轮状病毒增殖的影响。

结果

规模化生产中,MOI在0.002~0.074范围内影响轮状病毒致细胞病变的进程,与轮状病毒增殖量呈弱相关性,单次病毒收获液滴度均在7.0 lg荧光灶形成单位(fluorescent focus unit,FFU)/ml以上,符合质量标准(不低于6.5 lgFFU/ml)。

结论

轮状病毒疫苗规模化生产中,实际MOI与轮状病毒增殖量呈弱相关性。

引用本文: 石晨, 姜志军, 杨欣哲, 等.  规模化生产中实际感染复数对轮状病毒增殖的影响 [J] . 国际生物制品学杂志, 2023, 46(2) : 86-89. DOI: 10.3760/cma.j.cn311962-20220623-00033.
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有报道表明,轮状病毒的增殖强烈依赖于感染时的病毒感染复数(multiplicity of infection,MOI)和细胞密度[1,2]。MOI通常也被认为是轮状病毒培养条件中的关键因素[3]。宋菲菲等[4]在Vero细胞培养轮状病毒重配UD株关键条件的优化中选取MOI范围最低为0.01,且认为UD株MOI低于0.05时,病毒不能在Vero细胞上完全增殖。同样在实验室水平,我们用轮状病毒人-牛重配BRV株接种Vero细胞,在前期研究中选取的MOI范围下限也未超过0.01,并确定最适MOI为0.10。在人-牛重配BRV株轮状病毒活疫苗规模化生产中,以固定的MOI 0.1为理论值计算毒种的接种量。但由于毒种储存后冻融过程可能会影响病毒滴度,且毒种接种前需经过除菌过滤,过滤膜可能对病毒有吸附作用,因此导致接种时的实际MOI小于理论MOI。本实验探讨规模化生产中实际接种MOI的变化是否影响病毒增殖,以单次病毒收获液病毒滴度为主要指标,同时观察致细胞病变天数,探索较低的实际接种MOI是否可制备出符合质量标准的病毒液,为病毒培养工艺优化提供基础。

 
 
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