研究糖酵解关键酶6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2，6-二磷酸酶3（PFKFB3）对婴幼儿血管瘤（IH）内皮细胞（HemEC）生物活性的影响。
收集4例增殖期及4例消退期IH组织，从增殖期IH组织中提取原代HemEC，以脐静脉内皮细胞（HUVEC）为对照。通过免疫组化与Western印迹法分别检测PFKFB3在IH组织与HemEC中的表达水平。采用CCK8实验检测0 ~ 10 μmol/L PFKFB3特异性抑制剂PFK15对HemEC细胞增殖的影响。体外培养HemEC，采用5 μmol/L PFK15干预细胞，采用Transwell法观察HemEC迁移能力，流式细胞仪检测HemEC凋亡水平。组间比较采用t检验或方差分析。
免疫组化显示，增殖期IH组织中PFKFB3表达丰度（74.34% ± 5.26%）高于消退期（41.46% ± 2.99%，t = 9.40，P < 0.001）。Western印迹显示，HemEC中PFKFB3相对表达水平（0.73 ± 0.05）高于HUVEC（0.45 ± 0.04，t = 8.50，P < 0.001）。CCK8实验结果显示，0.625、1.25、2.5、5、10 μmol/L PFK15组HemEC增殖活性均低于对照组（均P < 0.01）。Transwell实验显示，PFK15干预组HemEC迁移数（297 ± 15）低于对照组（422 ± 8，t = 12.59，P < 0.001）。流式细胞仪检测显示，PFK15干预组HemEC凋亡率（6.69% ± 0.64%）高于对照组（0.34% ± 0.07%，t = 17.07，P < 0.001）。
糖酵解关键酶PFKFB3在IH增殖期组织与HemEC中高表达，PFKFB3抑制剂PFK15可抑制HemEC增殖、迁移并促进其凋亡。
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婴幼儿血管瘤（infantile hemangioma，IH）是婴幼儿最常见的良性肿瘤[1]，目前确切发病机制不明，但血管生成与IH发生发展密切相关。内皮细胞在血管生成的过程中，需要大量的能量供给以满足活化的尖细胞增殖以及茎细胞的迁移，同时还要合成大量的生物大分子如核苷酸、氨基酸等以满足内皮细胞活跃的增殖状态[2]。而糖酵解作为内皮细胞最主要的能量代谢方式，不仅可以提供生物大分子合成，同时还能快速提供三磷酸腺苷以及降低细胞内活性氧水平，从而促进内皮细胞血管生成等[3]。我们前期研究发现，细胞能量代谢相关信号通路如丙酮酸代谢等密切参与IH的发生发展[4]。当抑制糖酵解关键酶磷酸果糖激酶1（phosphofructokinase-1，PFK-1）表达时，血管瘤内皮细胞（hemangioma-derived endothelial cell，HemEC）的增殖与迁移能力均被抑制，同时凋亡水平升高[4]。此外，与消退期组织及脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell，HUVEC）相比，糖酵解通路相关代谢酶在IH增殖期组织与HemEC中表达均升高[5]。这些研究表明，葡萄糖代谢在IH发病中发挥重要调控作用，靶向抑制糖酵解可成为IH治疗的新方法。6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2，6-二磷酸酶3（6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2，6-biphosphatase 3，PFKFB3）可以将果糖-6磷酸催化成果糖-2，6二磷酸，后者可以激活PFK-1，从而增强细胞糖酵解水平。靶向干扰内皮细胞PFKFB3的表达后，不仅可以降低肿瘤细胞糖酵解水平，还能抑制病理性血管生成，以及肿瘤迁移，增强化疗效果等[6,7]。这些研究表明，PFKFB3对糖酵解具有重要的调控作用，然而PFKFB3在IH中对HemEC的生物学影响及作用却仍然不明。本研究旨在探究PFKFB3对HemEC活性的影响，以期为以糖酵解为靶点的IH治疗提供实验依据。
