探究甘氨酸脱氢酶(GLDC)基因通过PI3K/Akt/mTOR调控卵巢癌细胞增殖与凋亡的机制。
采用RNA干扰技术沉默卵巢癌HEY、SK-OV-3细胞中GLDC的表达，分别将细胞分为si-control组、si-GLDC#1组和si-GLDC#2组，si-control组为转染siRNA-control的细胞，si-GLDC#1组为转染siRNA-GLDC#1的细胞，si-GLDC#2组为转染siRNA-GLDC#2的细胞。采用蛋白质印迹法检测GLDC蛋白表达水平以及PI3K/Akt/mTOR蛋白磷酸化水平，分别采用CCK-8法、Transwell小室迁移实验、细胞划痕实验和流式细胞仪检测细胞增殖、迁移和凋亡能力。
GLDC在卵巢癌HEY细胞si-control组、si-GLDC#1组和si-GLDC#2组中的相对表达量分别为1.00±0.01、0.68±0.10、0.80±0.08，差异有统计学意义(F＝13.80，P＝0.006)；GLDC在卵巢癌SK-OV-3细胞si-control组、si-GLDC#1组、si-GLDC#2组中的相对表达量分别为1.02±0.01、0.58±0.17、0.60±0.25，差异具有统计学意义(F＝6.08，P＝0.036)。si-control组、si-GLDC#1组和si-GLDC#2组3组HEY细胞培养24 h后吸光度(A)值分别为1.04±0.03、0.91±0.02、0.82±0.01，48 h后分别为1.53±0.13、1.30±0.03、1.29±0.07，72 h后分别为1.44±0.08、1.25±0.01、1.15±0.03，差异均具有统计学意义(F＝83.14，P<0.001；F＝8.96，P＝0.007；F＝29.55，P<0.001)，进一步两两比较，24、48、72 h si-GLDC#1组、si-GLDC#2组细胞增殖活力均低于si-control组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。在HEY细胞中，si-control组、si-GLDC#1组、si-GLDC#2组迁移细胞数目分别为57.33±6.43、27.67±5.13、30.67±2.31，差异具有统计学意义(F＝32.88，P＝0.001)；si-GLDC#1组、si-GLDC#2组迁移细胞数较si-control组显著下降，差异均有统计学意义(P<0.001；P＝0.001)；在SK-OV-3细胞中也观察到类似结果。在SK-OV-3细胞中，si-control组、si-GLDC#1组、si-GLDC#2组的划痕愈合率分别为(51.27±1.59)%、(26.35±2.94)%、(26.34±7.69)%，差异具有统计学意义(F＝26.54，P＝0.001)；si-GLDC#1组、si-GLDC#2组细胞划痕愈合率较si-control组显著下降，差异均有统计学意义(均P＝0.001)。在HEY细胞中，si-control组、si-GLDC#1组、si-GLDC#2组细胞凋亡率分别为(7.11±0.82)%、(10.44±1.50)%、(17.39±1.55)%，差异具有统计学意义(F＝46.52，P<0.001)；si-GLDC#1组、si-GLDC#2组细胞凋亡率较si-control组均显著上升，差异均有统计学意义(P＝0.022；P<0.001)；在SK-OV-3细胞中也观察到类似结果。在HEY细胞中，si-control组、si-GLDC#1组、si-GLDC#2组中PI3K总蛋白差异无统计学意义(F＝0.54，P＝0.631)，但pAkt/Akt、pmTOR/mTOR水平差异具有统计学意义(F＝22.14，P＝0.016；F＝10.57，P＝0.044)；其中si-GLDC#1组、si-GLDC#2组较si-control组pAkt/Akt、pmTOR/mTOR均显著降低(P＝0.015，P＝0.008；P＝0.039，P＝0.023)；在SK-OV-3细胞中也观察到类似结果。
在卵巢癌细胞中，沉默GLDC可通过抑制PI3K/Akt/mTOR通路抑制细胞增殖并促进细胞凋亡。
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卵巢癌是当前女性生殖系统发病率前三、致死率位居首位的常见恶性肿瘤[1]。手术治疗和放化疗在一定程度上改善了患者的生存率，但由于卵巢癌具有高转移性、易复发、化疗药物耐药的特点导致卵巢癌的5年生存率较低[2]。寻找有效的治疗靶点对于卵巢癌的治疗显得尤为迫切。甘氨酸脱氢酶(glycine dehydrogenase，GLDC)是组成甘氨酸裂解系统的关键成分，参与机体甘氨酸代谢过程，是蛋白质及氨基酸代谢的核心代谢酶之一[3]。第1次发现GLDC与疾病相关是在一种罕见的常染色体隐性遗传病——非酮性高甘氨酸血症中[4]。GLDC在肺癌[5]、肝癌[6]等多种肿瘤的发生发展中发挥重要作用。本研究旨在探讨GLDC在卵巢癌的增殖、迁移、凋亡中的作用，以期为寻找卵巢癌有效的治疗靶点提供新的思路。
