实验研究
8种人胰腺癌细胞株常见肿瘤相关基因突变特征分析
中华实验外科杂志, 2020,37(4) : 667-669. DOI: 10.3760/cma.j.cn421213-20200205-00058
摘要
目的

分析8种人胰腺癌细胞株中常见肿瘤相关基因突变,为胰腺癌基础研究中选择合适的细胞株提供依据。

方法

体外培养8种人胰腺癌细胞株(AsPC-1、BxPC-3、Capan-1、Capan-2、MIA PaCa-2、PANC-1、Patu8988和T3M4,均购自美国模式培养物集存库),采用二代测序技术检测113个肿瘤相关基因突变情况,结合京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库对突变基因进行功能分析。

结果

二代测序结果显示,8种人胰腺癌细胞株中共确定36个基因、79个位点发生突变。鼠类肉瘤病毒癌基因(KRAS)、肿瘤蛋白P53(TP53)、细胞周期依赖性激酶抑制基因(CDKN2A)和胰腺癌缺失基因(DPC4/SMAD4)在8种胰腺癌细胞株中的突变率分别为87.5%(7/8)、100.0%(8/8)、50.0%(4/8)和37.5%(3/8)。AsPC-1和Capan-1细胞中同时存在上述4个基因的突变,BxPC-3细胞株是KRAS野生型胰腺癌,CDKN2A基因在AsPC-1、Capan-1、Capan-2和Patu8988细胞中检测到突变,而DPC4/SMAD4在AsPC-1、Capan-1和T3M4细胞中发生突变。其他发生率较高的突变基因包括AT丰富结合域1A(ARID1A)基因(AsPC-1、Capan-1、Capan-2、MIA PaCa-2和T3M4发生突变)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREBBP)基因(Capan-1、Capan-2、MIA PaCa-2和T3M4发生突变)、NOTCH1(BxPC-3、Capan-2、MIA PaCa-2和T3M4发生突变)、腺瘤性息肉病(APC)基因(AsPC-1、Capan-1和Patu8988发生突变)和E1A结合蛋白P300(EP300)基因(BxPC-3、MIA PaCa-2和T3M4发生突变)。突变基因功能主要涉及Ras/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、细胞周期调控、Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路、NOTCH信号通路、染色质重塑复合物家族、转化生长因子β(TGF-β)信号通路、DNA损伤修复、Hedgehog和磷脂酰肌醇3激酶丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K-Akt)信号通路等。

结论

8种胰腺癌细胞株具备人胰腺癌组织的基因学特征,不同细胞株具有不同的基因突变特点,实验研究中应根据不同细胞的基因突变情况合理选择细胞株并分析研究结果。

引用本文: 王琦, 陈凯, 金博, 等.  8种人胰腺癌细胞株常见肿瘤相关基因突变特征分析 [J] . 中华实验外科杂志, 2020, 37(4) : 667-669. DOI: 10.3760/cma.j.cn421213-20200205-00058.
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胰腺癌是恶性程度极高的消化道恶性肿瘤,手术切除率极低、放化疗效果不理想,总体5年生存率仅为9%左右。针对胰腺癌发生发展、化疗耐药、早期诊断和新的治疗靶点的研究是胰腺癌基础研究领域的热点,其中应用最广泛的研究对象是人胰腺癌细胞株。由于不同细胞株之间存在较大的遗传背景差异,因此实验设计中需要根据基因特点选择合适的细胞株作为研究对象。本实验室长期保存8种人胰腺癌细胞株,为明确这些细胞株中常见肿瘤相关基因的突变,我们对113个肿瘤相关基因进行二代测序,旨在为实验研究中选择合适的细胞株提供依据。

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