建立人膀胱癌顺铂(CDDP)耐药细胞株T24/CDDP，鉴定其生物学特性，并探讨其对CDDP耐药的机制。
采用CDDP浓度逐步递增联合大剂量CDDP冲击方法，在体外连续诱导、培养膀胱癌细胞株T24细胞，建立对CDDP耐药的细胞株T24/CDDP。CCK-8法测定T24/CDDP细胞对CDDP的耐药指数；绘制细胞生长曲线，计算细胞群体倍增时间；流式细胞术检测T24细胞和T24/CDDP细胞的细胞周期比例；Western blot测定细胞中蛋白激酶Cα(PKCα)和P-糖蛋白(P-gp)蛋白的表达。
T24细胞在体外采用CDDP浓度逐步递增联合大剂量CDDP冲击方法连续诱导、培养，历时11个月，成功建立了对CDDP耐药的细胞株T24/CDDP，其耐药指数为4.17。T24细胞和T24/CDDP细胞的群体倍增时间分别为(33.61±0.41)h和(39.94±0.63)h，两者比较差异有统计学意义(t＝14.59，P＝0.00)。与T24细胞相比，T24/CDDP细胞的S期细胞比例减少[(30.63±2.74)% vs (35.38±3.31)%]，但差异无统计学意义(P>0.05)。G0/G1期细胞比例增加[(60.42±3.25)% vs (47.25±4.17)%]，G2/M期细胞比例减少[(8.95±2.81)% vs (17.37±3.46)%]，差异均有统计学意义(t＝4.31，P＝0.006；t＝3.27，P＝0.015)。T24细胞和T24/CDDP细胞中均有PKCα和P-gp蛋白的表达。与T24细胞相比较，T24/CDDP细胞中PKCα和P-gp蛋白表达水平均显著升高[(3.12±0.11) vs (1.37±0.06)，t＝24.19，P＝0.00；(1.98±0.08) vs (0.47±0.03)，t＝30.61，P＝0.00]。
T24/CDDP细胞具有耐药表型及耐药细胞的生物学特性，其耐药机制可能与细胞中PKCα和P-gp蛋白的过度表达有关。
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顺铂(cisplatin，CDDP)是膀胱癌化疗方案中的"骨架"化疗药物，与吉西他滨(gemcitabine，GEM)联合使用(GC方案)已成为肌层浸润性膀胱癌患者的一线标准化疗方案。但由于肿瘤细胞在化疗过程中多药耐药(multidrug resistance，MDR)的产生，仅有12%～22%的晚期膀胱癌患者在接受GC方案治疗后得到完全缓解[1]。膀胱癌CDDP耐药细胞株是深入进行膀胱癌多耐药机制研究的前提，为此，笔者于2013年1月至2014年5月在本院泌尿外科转化医学实验室进行实验，以人膀胱癌T24细胞株为诱导对象，采用浓度逐步递增联合大剂量冲击法建立起人膀胱癌CDDP耐药细胞株T24/CDDP，鉴定其生物学特性，并探讨其对CDDP耐药的机制。
