论著
黄芪甲苷介导内皮祖细胞外泌体改善高糖受损人内皮细胞生物学功能的研究
中国医师杂志, 2021,23(10) : 1481-1486. DOI: 10.3760/cma.j.cn431274-20200916-01297
摘要
目的

探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)介导人内皮祖细胞外泌体(EPC-Exos)对高糖受损人内皮细胞生物学功能的影响。

方法

体外分离和培养人脐带血内皮祖细胞(EPCs);将鉴定成功的EPCs用100 mg/L的AS-Ⅳ液处理,培养24 h后,采用超速离心法结合超滤法提取EPCs分泌的外泌体即EPC-Exos,采用特异性标志物CD9、CD63、CD81鉴定EPC-Exos,透射电镜观察EPC-Exos的形态特征。同时体外分离、培养并鉴定人内皮细胞,将鉴定成功的内皮细胞用30 mmol/L的葡萄糖预处理120 h后,随机分为实验组(用EPC-Exos干预)和对照组(用PBS干预),同时设置正常组(无糖培养基培养的内皮细胞)。三组细胞培养24 h后,通过CCK-8细胞增殖检测试剂盒、细胞划痕试验、黏附能力测定试验及Matrigel体外成血管试验观察经AS-Ⅳ干预的EPC-Exos对高糖受损内皮细胞增殖、黏附、迁移和成管功能的影响。

结果

与正常组比较,对照组人内皮细胞增殖、迁移、黏附及成管能力显著降低(t=24.35、6.80、10.65、9.62,P<0.05)。与对照组比较,实验组人内皮细胞增殖、黏附、迁移及成管能力显著增强(t=30.68、5.99、5.40、8.25,P<0.05)。

结论

高糖受损状态下的人内皮细胞生物学功能严重受损;通过黄芪甲苷介导的EPC-Exos可显著改善高糖受损人内皮细胞的生物学功能,具有调节糖尿病损伤内皮血管新生的潜能。

引用本文: 朱芙蓉, 阳嘉伦, 周忠志, 等.  黄芪甲苷介导内皮祖细胞外泌体改善高糖受损人内皮细胞生物学功能的研究 [J] . 中国医师杂志, 2021, 23(10) : 1481-1486. DOI: 10.3760/cma.j.cn431274-20200916-01297.
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外泌体是细胞内多囊体与细胞膜融合后释放到胞外的小囊泡,最早由Pan等[1]在绵羊网织红细胞中发现,由Johnstone等[2]从网织红细胞中分离出这些囊泡状小体,借助囊泡可直接转移入mRNA、miRNA及蛋白质等生物活性分子。内皮祖细胞外泌体(endothelial progenitor cells derived exosomes,EPC-Exos)是内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)分泌的重要物质之一,随着对EPC-Exos研究广泛开展,发现其可促进人内皮细胞[3]和血管壁平滑肌细胞[4]增殖和迁移,从而起到修复血管的作用,而这与EPCs分泌外泌体的功能密不可分。探索如何诱导EPC的分泌以提高EPC-Exos的生物学功能、优化缺血性疾病的治疗方案,已然成为当前研究的热点。本团队经前期研究发现黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,AS-Ⅳ)具有介导EPCs以增强血管新生的潜能,且促进人EPCs增殖的最佳浓度是100 mg/L[5]。本研究是在前期研究基础上探索AS-Ⅳ通过EPCs改善高糖受损内皮细胞功能的途径,为深入研究AS-Ⅳ介导EPC-Exos发挥血管新生的作用机制奠定基础。

 
 
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