评价乙型肝炎病毒（HBV）慢性携带小鼠中CD27和CD11b标记自然杀伤（NK）细胞亚群的变化。
将pAAV-HBVl.2质粒采用高压水动力法尾静脉注入C57BL/6小鼠体内，作为造模组，空载质粒作为对照组；检测不同时间点肝功能和病毒学指标判断HBV质粒慢性携带动物模型构建情况；采用流式细胞术检测脾脏和肝脏中NK细胞及CD11b联合CD27划分的NK细胞亚群的频数；采用Graphpad Prism软件进行统计学分析。
小鼠HBV持续携带模型构建成功。与对照组相比，HBV慢性携带小鼠的脾脏和肝脏中的NK细胞频数差异均无统计学意义（P值均>0.05）。CD27联合CD11b将NK细胞划分为CD11b+CD27-(CD11b+SP）、CD11b+CD27+(DP）、CD11b-CD27+(D27+SP）和CD11b-CD27-(DN）四个亚群，与对照组相比，HBV慢性携带小鼠的脾脏中四个NK细胞亚群的频数差异均无统计学意义（P值均> 0.05）。HBV慢性携带小鼠的肝脏中DN NK细胞亚群的频数与对照组比较显著增多（P < 0.001），CD11b+SP细胞亚群的频数显著减少（P < 0.05），DP和CD27+SP两个NK细胞亚群频数差异均无统计学意义（P值均> 0.05）。
HBV慢性携带小鼠肝脏NK细胞亚群分布异常，DN NK细胞亚群的频数明显增多，CD11b+SP细胞亚群的频数显著减少。
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据统计全球约20亿人曾感染乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)，其中约2.4亿人为慢性HBV感染者。HBV慢性感染可导致肝衰竭、肝硬化和肝细胞癌的发生，严重威胁人类的健康[1]。宿主免疫反应是决定HBV感染清除或慢性化的重要因素。HBV在机体形成持续感染，需要通过一系列机制破坏机体的抗病毒反应。自然杀伤细胞（natural killer cells，NK细胞）作为天然免疫系统的重要组成部分，不仅可以通过杀伤功能清除病毒感染的细胞，还能通过分泌细胞因子进一步启动和调节获得性免疫反应。由于获取肝脏组织受限，目前关于NK细胞在HBV感染中的研究主要集中在人类外周血和动物模型上。而高压注射携带HBV基因组的pAAV-HBVl.2质粒能在小鼠中形成HBV持续表达，与人类的慢性感染尤其是免疫耐受阶段相似[2]，是目前应用最广泛的研究HBV慢性感染的动物模型。NK细胞本身是一个异质性的细胞群体，表面分子CD27联合CD11b可以将小鼠NK细胞划分为CD11b+CD27-(CD11b+ SP)、CD11b+CD27+(DP)、CD11b-CD27+(D27+ SP)和CD11b-CD27-(DN)四个不同的功能亚群[3]。研究慢性HBV感染小鼠模型中NK细胞亚群的分布情况有利于我们更加准确阐明NK细胞在慢性HBV感染中的作用。
