基于16S核糖体RNA（16S rRNA）高通量测序分析严重烧伤患者早期肠道菌群变化并进行代谢功能预测。
本前瞻性观察性研究将2018年1月—2019年12月江苏大学附属医院烧伤整形科收治的48例符合入选标准的严重烧伤患者纳入烧伤组，将同时期于江苏大学附属医院体检中心进行健康检查的符合入选标准的40名健康志愿者纳入健康组。收集烧伤组患者入院后1周左右的粪便标本及健康组志愿者体检当天粪便标本，进行16S rRNA V4区基因测序，分析各类菌属的相对丰度；应用Mothur软件进行操作分类单元（OTU）划分，分析优势菌群；通过QIIME1.9.0软件分析粪便菌群OTU数目、Chao1指数、Ace指数、Shannon指数；采用Canoco Software 5.0对粪便菌群相对丰度做主成分分析；采用京都基因和基因组数据库预测粪便菌群代谢功能。对数据行独立样本t检验、Mann-Whitney U检验。
烧伤组患者粪便中拟杆菌属、肠球菌属、不动杆菌属、巨球型菌属、葡萄球菌属相对丰度明显高于健康组志愿者（Z=-5.20、-2.37、-5.17、-4.41、-6.03，P<0.05或P<0.01），而健康组志愿者粪便中未分类的毛螺杆菌科、普氏菌属、盲杆菌属、未分类的瘤胃球菌科、假丁酸弧菌属、布劳特菌属、未分类的消化链球菌科（Z=-8.03、-3.21、-7.63、-5.88、-8.05、-8.05、-6.77，P<0.01）等19种菌属的相对丰度明显高于烧伤组患者。健康组志愿者粪便菌群多样性优于烧伤组患者，其主要优势菌群为拟杆菌属、未分类的毛螺杆菌科、普氏菌属、未分类的肠杆菌科、布劳特菌属、副拟杆菌属和大肠志贺杆菌属等，而烧伤组患者粪便主要优势菌群为拟杆菌属、普氏菌属、未分类的肠杆菌科和副拟杆菌属。烧伤组患者粪便菌群OTU数目、Ace指数、Chao1指数、Shannon指数分别为（149±47）个、199±45、190±45、2.0±0.9，显著少/低于健康组志愿者的（266±57）个、323±51、318±51、3.8±0.5（t=10.325、11.972、12.224、11.662，P<0.01）。健康组志愿者和烧伤组患者粪便菌群相对丰度在主成分1 被清晰地区分为2个群体，主成分1贡献率为32.50%，P<0.01；健康组志愿者粪便菌群在主成分2上较为集中，烧伤组患者粪便菌群在主成分2上散布较大，主成分2贡献率为13.44%，P>0.05。烧伤组患者粪便菌群氨基酸中丙氨酸-天冬氨酸-谷氨酸、精氨酸-脯氨酸、半胱氨酸-蛋氨酸、甘氨酸-丝氨酸-苏氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸以及碳水化合物中三羧酸循环、果糖和甘露糖、半乳糖、酵解/糖异生、淀粉和蔗糖代谢水平显著低于健康组志愿者（Z=-4.75、-4.54、-4.75、-4.62、-3.71、-3.28、-4.19，-3.82、-4.72、-4.35、-4.75、-4.71，P<0.01），硫辛酸代谢和辅酶Q合成水平明显高于健康组志愿者（Z= -6.07、-4.51，P<0.01），花生四烯酸代谢水平与健康组志愿者相近（P>0.05）。
基于16S rRNA高通量测序得出，严重烧伤患者早期肠道菌群和健康人群存在明显差异，烧伤患者肠道菌群种类减少，多样性降低，营养代谢水平降低。
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肠道微生态对机体营养物质代谢、发育、免疫及疾病的产生等均起到极其重要的作用［1, 2, 3］。严重烧伤后肠道内微生物和LPS可通过受损的肠黏膜屏障侵入到体循环，导致细菌易位和内毒素血症［4］。与轻度烧伤患者相比，重度烧伤患者肠道菌群中肠杆菌科类的“有害菌”比例显著升高。一般认为，核糖体RNA（rRNA）基因广泛存在于所有细胞生物体中，由于很少发生大规模的横向基因迁移或基因突变，适合用于微生物分类信息的确定。原核生物（细菌、古菌）rRNA按核酸的沉降系数分类可分为3种，即5S、16S和23S。16S rRNA基因存在于所有细菌染色体基因组中，参与生物蛋白质的合成过程，并在生物进化的漫长历程中保持一定的遗传保守性，是细菌系统分类研究中最有用和最常用的分子标记［5］。16S rRNA编码基因序列V4~V6区数据库信息全、特异性好，是细菌多样性分析的常用目标区域。随着高通量测序技术的不断发展和参考数据库的不断更新，利用核糖体操纵子作为DNA标记可以揭示不同生态系统中的微生物多样性和组成［6］。本研究旨在通过16S rRNA高通量测序，比较48例严重烧伤患者伤后早期和40名健康志愿者肠道微生物菌群种类及代谢功能差异，初步揭示严重烧伤早期肠道微生态的变化。
本前瞻性观察性研究经江苏大学附属医院生物医学研究伦理委员会批准，批号：SWYXLL20170 925，烧伤患者和健康志愿者均签署知情同意书。
粪便DNA快速提取试剂盒购于德国QIAGEN公司，GoTaq®热启动混合母液高效高保真酶购于美国Promega公司。Qubit3.0型荧光定量检测仪购于美国Molecular Device公司，Illumina MiSeq型基因测序仪购于美国Illumina公司，OneDrop OD-1000型紫外/可见光分光光度计购于南京五义科技有限公司。
烧伤患者纳入标准：（1）年龄18~75岁，性别不限；（2）热液及火焰烧伤；（3）符合严重烧伤诊断标准，包括烧伤总面积>50%TBSA或Ⅲ度烧伤面积>20%TBSA；（4）伤后24 h内入院。排除标准：（1）合并严重心、肺、肝、肾、神经系统疾病，有肠道基础疾病，或明确有其他系统恶性肿瘤、糖尿病、自身免疫性疾病者；（2）有明显的精神障碍、癫痫等症状者；（3）研究者判断不能完成或不宜参加本研究者。
健康志愿者纳入标准：（1）饮食正常，无吸烟、饮酒等，每日排便1次或2次；（2）3个月内无抗生素服用史；（3）无严重心、肺、肝、肾、神经系统疾病，无肠道基础疾病，无其他系统恶性肿瘤、糖尿病、自身免疫性疾病者；（4）无明显精神障碍、癫痫等。
将2018年1月—2019年12月江苏大学附属医院烧伤整形科收治的48例符合入选标准的严重烧伤患者纳入烧伤组，其中男31例、女17例，年龄（42±4）岁，烧伤总面积（79±10）%TBSA，Ⅲ度烧伤面积（28±7）%TBSA。观察期间严重烧伤患者进行烧伤常规治疗，患者伤后不同阶段应用不同抗生素，并根据创面分泌物或血细菌培养结果及药物敏感试验结果进行调整。烧伤总面积>50%TBSA患者休克期予以禁食，以肠外静脉营养为主，随后逐步恢复流质饮食，减少静脉营养量，随着病情的稳定逐渐过渡到普通饮食。采集患者入院后1周左右的粪便标本并规范保存。
将2018年1月—2019年12月于江苏大学附属医院体检中心进行健康检查的符合入选标准的40名健康志愿者纳入健康组，其年龄为40~60岁，男、女性均为20名。采集体检当日粪便标本并规范保存。
选用粪便DNA快速提取试剂盒提取烧伤患者和健康志愿者粪便样本基因组DNA，进行高通量16S rRNA基因测序分析，主要步骤如下。（1）粪便样本总DNA的提取与质检：粪便均质—收集菌体—菌体保存—细胞裂解—DNA抽提—DNA沉淀收集—DNA质检。（2）PCR扩增及产物纯化：采用16S rRNA基因V4区通用引物，上游引物515F 5'-GTGCCAGC MGCCGCGGTAA-3'，下游引物806R 5'-GGACTA- CHVGGGTWTCTAAT-3'（美国Life公司）。（3）上机测序：采用荧光定量检测仪进行定量，然后使用基因测序仪测序。
（1）基因序列通过质量检查后，应用核糖体数据库项目分类算法2.3将样本序列与Silva数据库（https：//www.arb-silva.de/）进行序列比对，确定样本中每条序列的分类等级（界、门、纲、目、科、属、种）［7］，记录各样本的菌群分类信息，分析各类菌属在样本中的相对丰度。（2）应用Mothur软件（https：//mothur.org/）进行操作分类单元（OTU）划分，以序列相似性97%为标准，绘制粪便菌群结构热力图，分析优势菌群。（3）通过QIIME1.9.0软件（http//www.qiime.org）进行样本菌群OTU数目分析，计算样本菌群α多样性指数［8］，包括丰度指数（Chao1指数和Ace指数）、多样性指数（Shannon指数）。（4）基于样本菌群的相对丰度，应用Canoco Software 5.0（http：//www.canoco5.0com/）对样本做主成分分析（PCA），找出样本中对组间差异贡献较大的因素［9］，运用方差分解将2组菌群相对丰度的差异降维分析为不相关的变量线性组合，以散点图的形式反映在二维坐标图上，以百分数的形式体现主成分主要影响程度［10, 11］。（5）通过京都基因和基因组数据库［12］对样本菌群基因测序结果进行氨基酸、碳水化合物、脂质、辅助因子及维生素合成等代谢功能预测［13］。
应用SPSS 19.0统计软件对数据进行分析。计量资料中符合正态分布的数据用表示，组间比较采用独立样本t检验；不符合正态分布的数据采用M（P25，P75）表示，组间比较行Mann-Whitney U检验。P<0.05为差异有统计学意义。
除未分类的肠杆菌科、乳杆菌属、副拟杆菌属（P>0.05）外，烧伤组患者粪便中拟杆菌属、肠球菌属、不动杆菌属、巨球型菌属、葡萄球菌属相对丰度明显高于健康组志愿者（P<0.05或P<0.01），而健康组志愿者粪便中未分类的毛螺杆菌科、普氏菌属、盲杆菌属、未分类的瘤胃球菌科、假丁酸弧菌属、布劳特菌属、未分类的消化链球菌科等19种菌群的相对丰度明显高于烧伤组患者（P<0.01）。见表1。
健康组健康志愿者和烧伤组严重烧伤患者伤后早期粪便菌群科或属水平相对丰度比较[%，M（P25，P75）]
健康组健康志愿者和烧伤组严重烧伤患者伤后早期粪便菌群科或属水平相对丰度比较[%，M（P25，P75）]
| 组别 | 人数/例数 | 拟杆菌属 | 未分类的毛螺杆菌科 | 普氏菌属 | 未分类的肠杆菌科 | 副拟杆菌属 | 盲杆菌属 | 肠球菌属 | 未分类的瘤胃球菌科 | 大肠志贺杆菌属 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 健康组 | 40 | 12.65（6.88，20.56） | 11.38（8.10，18.79） | 1.38（0.22，2.23） | 0.36（0.12，1.68） | 0.69（0.22，1.48） | 3.89（2.33，10.24） | 0.01（0，0.04） | 3.52（1.91，5.37） | 0.87（0.31，2.98） |
| 烧伤组 | 48 | 51.82（24.89，81.99） | 0.06（0.04，1.25） | 0.16（0.08，0.68） | 1.51（0.16，3.97） | 1.78（0.16，7.50） | 0.04（0.02，0.25） | 0.06（0.01，0.13） | 0.05（0.03，0.68） | 0.32（0.09，1.00） |
| Z值 | -5.20 | -8.03 | -3.21 | -1.47 | -1.69 | -7.63 | -2.37 | -5.88 | -3.37 | |
| P值 | <0.001 | <0.001 | 0.002 | 0.152 | 0.103 | <0.001 | 0.022 | <0.001 | 0.001 |
| 组别 | 人数/例数 | 假丁酸弧菌属 | 布劳特菌属 | 未分类的消化链球菌科 | 链球菌属 | 双歧杆菌属 | 不动杆菌属 | 瘤胃球菌属 | 小杆菌属 | 考拉杆菌属 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 健康组 | 40 | 4.31（1.71，6.25） | 8.03（4.47，15.55） | 2.47（1.50，3.23） | 0.46（0.18，0.58） | 2.16（0.56，4.21） | 0 | 1.60（0.87，1.92） | 0.20（0.04，0.30） | 0.39（0.15，0.56） |
| 烧伤组 | 48 | 0.01（0，0.03） | 0.02（0.01，0.08） | 0.02（0.01，0.11） | 0.05（0.02，0.33） | 0.01（0，0.03） | 0.02（0，0.06） | 0.01（0，0.02） | 0 | 0.02（0.01，1.30） |
| Z值 | -8.05 | -8.05 | -6.77 | -4.17 | -7.28 | -5.17 | -7.40 | -7.00 | -3.74 | |
| P值 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | <0.001 |
| 组别 | 人数/例数 | 巨球型菌属 | 粪球菌属 | 放线菌科杆菌属 | 乳杆菌属 | 罗氏菌属 | 葡萄球菌属 | 未分类的梭菌属 | 毛螺杆菌属 | 嗜血杆菌属 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 健康组 | 40 | 0.01（0，0.07） | 0.95（0.72，3.61） | 1.21（0.43，2.63） | 0.05（0.01，0.25） | 1.12（0.41，1.53） | 0 | 0.58（0.26，1.04） | 0.32（0.22，0.48） | 0.12（0.03，0.26） |
| 烧伤组 | 48 | 0.03（0.01，0.97） | 0 | 0 | 0.11（0.02，0.41） | 0 | 0.01（0，0.07） | 0 | 0 | 0 |
| Z值 | -4.41 | -8.10 | -7.63 | -1.47 | -7.94 | -6.03 | -6.87 | -7.42 | -7.72 | |
| P值 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | 0.154 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | <0.001 |
注：罕见小球菌属、嗜黏蛋白-艾克曼菌属、萨特菌属等23种菌群相对丰度太小，未列出
健康组志愿者粪便菌群多样性优于烧伤组，其主要优势菌群分别为拟杆菌属、未分类的毛螺杆菌科、普氏菌属、未分类的肠杆菌科、布劳特菌属、副拟杆菌属和大肠志贺杆菌属等，而烧伤组患者粪便主要优势菌群为拟杆菌属、普氏菌属、未分类的肠杆菌科和副拟杆菌属。见图1。
注：1A、1B中每行从左到右的40、48个色块代表40名健康志愿者和48例烧伤患者的样本
烧伤组患者粪便菌群OTU数目、Ace指数、Chao1指数、Shannon指数显著少/低于健康组志愿者（t=10.325、11.972、12.224、11.662，P<0.01）。见图2。
注：与健康组相比，aP<0.01
主成分1和主成分2是造成健康组志愿者和烧伤组患者粪便菌群差异较大的2个因素。2组粪便菌群相对丰度可以在主成分1被清晰地区分为2个群体，主成分1贡献率为32.50%，P=0.002。健康组志愿者粪便菌群聚类在主成分2上较为集中，烧伤组患者粪便菌群聚类在主成分2上散布较大，主成分2贡献率为13.44%，P＞0.05。见图3。
注：每个色块代表一个样本，每个色块分别垂直于横、纵坐标上的距离代表样本受主成分1和主成分2影响的程度，样本间越聚集，说明相识程度越高
烧伤组患者粪便菌群氨基酸、碳水化合物代谢水平显著低于健康组志愿者（P<0.01），烧伤组患者硫辛酸代谢和辅酶Q合成水平水平明显高于健康组志愿者（P<0.01），烧伤组患者花生四烯酸代谢水平与健康组志愿者相近（P>0.05）。见表2。
健康组健康志愿者和烧伤组严重烧伤患者伤后早期粪便菌群代谢水平比较[%，M（P25，P75）]
健康组健康志愿者和烧伤组严重烧伤患者伤后早期粪便菌群代谢水平比较[%，M（P25，P75）]
| 组别 | 人数/例数 | 氨基酸代谢 | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 丙氨酸-天冬氨酸-谷氨酸代谢 | 精氨酸-脯氨酸代谢 | 半胱氨酸-蛋氨酸代谢 | 甘氨酸-丝氨酸-苏氨酸代谢 | 苯丙氨酸代谢 | 色氨酸代谢 | 酪氨酸代谢 | ||
| 健康组 | 40 | 2.14（1.59，2.75） | 2.53（1.97，3.22） | 1.85（1.50，2.41） | 1.59（1.30，2.00） | 0.34（0.28，0.44） | 0.25（0.17，0.31） | 0.63（0.52，0.83） |
| 烧伤组 | 48 | 1.22（1.09，1.31） | 1.29（1.08，1.50） | 0.91（0.81，0.99） | 0.84（0.72，0.93） | 0.22（0.19，0.26） | 0.10（0.09，0.17） | 0.35（0.31，0.42） |
| Z值 | -4.75 | -4.54 | -4.75 | -4.62 | -3.71 | -3.28 | -4.19 | |
| P值 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | 0.001 | <0.001 | |
| 组别 | 人数/例数 | 碳水化合物代谢 | ||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 三羧酸循环 | 果糖和甘露糖代谢 | 半乳糖代谢 | 糖酵解/糖异生 | 淀粉和蔗糖代谢 | ||
| 健康组 | 40 | 1.00（0.85，1.26） | 1.96（1.42，2.58） | 1.58（1.24，2.08） | 2.16（1.74，2.78） | 2.05（1.54，2.72） |
| 烧伤组 | 48 | 0.76（0.66，0.86） | 1.07（0.94，1.19） | 0.95（0.76，1.12） | 1.10（0.99，1.24） | 1.09（0.95，1.22） |
| Z值 | -3.82 | -4.72 | -4.35 | -4.75 | -4.71 | |
| P值 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | |
| 组别 | 人数/例数 | 花生四烯酸代谢 | 硫辛酸代谢 | 辅酶Q合成 |
|---|---|---|---|---|
| 健康组 | 40 | 0.03（0.02，0.05） | 0.04（0.03，0.05） | 0.22（0.15，0.28） |
| 烧伤组 | 48 | 0.04（0.03，0.05） | 0.08（0.06，0.10） | 0.32（0.27，0.37） |
| Z值 | -1.59 | -6.07 | -4.51 | |
| P值 | 0.125 | <0.001 | <0.001 |
长期以来，临床对于严重烧伤的救治主要集中在肺脏、肾脏、皮肤等重要的脏器和组织［14, 15, 16］。由于肠道疾病在烧伤早期不易出现明显症状，致使早期的临床治疗忽视了肠道微生态在严重烧伤发生发展过程中的重要性。肠道菌群数量庞大，它们对肠道营养的摄取、免疫功能的维持以及肠黏膜生物屏障的保护都有重要的作用［17, 18, 19］。严重烧伤可严重影响肠道的微环境，从而导致肠道菌群的失衡［20］。严重烧伤导致机体体液大量流失，肠道组织长期灌注不足以及烧伤诱导的促炎介质的剧增都可能导致肠黏膜上皮萎缩、凋亡，肠道细胞间的间隙变大，从而提高肠道的通透性［21］。严重烧伤患者处于高分解代谢状态，机体糖利用的抑制、内源性脂肪分解的加速、机体蛋白质分解的增强都给肠道稳态的维持带来巨大挑战［22］。感染是大面积烧伤患者最常见的并发症［23, 24］，为防止严重烧伤早期感染发展成危及患者生命的脓毒症，临床中往往会使用大量的广谱抗生素，而广谱抗生素没有辨别“好菌”和“坏菌”的能力，会将大部分不耐药的菌群杀死，从而破坏肠道菌群的稳态［25］。
越来越多的研究在逐步阐明烧伤和肠道菌群失衡的联系。本研究证实，严重烧伤患者肠道菌群种类、数量和多样性均受到了影响，处于严重的失衡状态。健康志愿者肠道优势菌群主要为拟杆菌属、未分类的毛螺杆菌科、普氏菌属、未分类的肠杆菌科、布劳特菌属、副拟杆菌属、大肠志贺杆菌属等厚壁菌门，说明肠道中需要更多的专性厌氧菌（厚壁菌门和拟杆菌门为主）参与营养物质的吸收和代谢。严重烧伤患者肠道拟杆菌属、肠球菌属、不动杆菌属、巨球型菌属、葡萄球菌属相对丰度明显高于健康志愿者。拟杆菌属是人和动物体内大量存在的正常菌群，但是当其含量超过正常水平就会对机体产生不利影响。有研究表明，直肠癌、2型糖尿病以及溃疡性结肠炎患者肠道菌群中拟杆菌属的比例明显增加［26］，提示减少拟杆菌属含量可能是维持肠道菌群稳态的重要治疗方法。未分类的毛螺杆菌科、大肠志贺杆菌属、未分类的瘤胃球菌科、假丁酸弧菌属等菌属中很多成员被认为是丁酸产生菌［27］，本研究中严重烧伤患者肠道菌群中假丁酸弧菌属的相对丰度远低于健康人群。丁酸具有一定的抗炎和保护脏器的功能，烧伤患者丁酸产生菌的减少可导致肠道微血管内皮细胞收缩和细胞间隙增宽，进而使内皮屏障遭受破坏，血管内液体向组织内渗出，引起组织水肿和器官功能障碍。α多样性是指单个样品内部的5种多样性分析，常用的指标包括OTU数目、Ace指数、Chao1指数、Shannon指数等，这些数据越大说明该样本的物种越丰富。本研究结果显示，健康人群的肠道菌群多样性及稳定性高，而严重烧伤患者肠道菌群种类减少、多样性降低，这与本研究中菌群结构差异的结果一致。
PCA是一种研究数据相似性或差异性的可视化方法，采取降维的思想，PCA可以找到距离矩阵中最主要的坐标，把复杂的数据用一系列的特征值和特征向量进行排序后，选择前几位主要特征值，来表示样品之间的关系，通过PCA可以观察个体或群体间的差异。PCA中的百分数表示对应特征向量对数据的解释量，此值越大说明样本在这一向量中的聚集度越高［28］。本研究将PCA用于分析菌群丰度差异与烧伤这一因素之间的关系［26］，结果表明健康人群肠道菌群相似度较高，而严重烧伤患者因伤后肠道菌群结构出现不同程度的失衡，菌群结构差异较大。不同程度肠道菌群失衡与烧伤面积、深度及合并的复合伤，如吸入性损伤、脏器损伤等均存在一定联系，但这些因素在肠道菌群失衡中的具体作用需进一步研究。
严重烧伤患者机体处于强烈的应激状态下，各种物质的代谢都处于高水平的紊乱之中。有研究显示，早期肠内营养对急性胰腺炎和脑卒中患者肠道菌群的失调以及患者的营养状态有显著的改善作用［29］。本研究中粪便菌群功能预测结果显示，严重烧伤患者早期各类氨基酸、碳水化合物的代谢水平明显低于健康志愿者，硫辛酸代谢和辅酶Q合成水平明显高于健康志愿者。蛋白质及氨基酸是生命活动的重要物质及体内代谢活性物质（激素、酶、免疫抗体）的主要成分，是组织更新、修补的原料，谷氨酸是氨基酸合成过程中关键的氨基供体，丝氨酸、甘氨酸、半胱氨酸是细菌中多种氨基酸的重要代谢产物和前体，也是鞘脂、叶酸、甲烷和丙酮酸等的代谢前体，丝氨酸还参与嘌呤和嘧啶的生物合成，氨基酸代谢水平的降低会对机体各种功能产生影响。研究表明，短链脂肪酸是肠道微生物群重要的能量来源［30］，可调节宿主肠道免疫，降低炎症反应，烧伤患者碳水化合物代谢的降低会减少短链脂肪酸的合成，影响肠黏膜屏障功能，这提示对烧伤患者伤后早期进行适当肠内营养可补充缺少的短链脂肪酸，进而保障肠内的碳水化合物代谢。
本研究揭示了严重烧伤早期患者肠道菌群处于失衡状态，而肠道菌群的结构异常以及代谢紊乱会增加患者并发感染、营养不良等概率。临床上及时、动态地调节患者肠道菌群结构及代谢（如氨基酸的代谢），减少广谱抗生素的使用，适宜的肠内营养，逐步增加饮食等会改善患者肠道微环境，对于改善患者的预后具有重要意义。目前粪菌移植已经被报道用于难辨梭状芽孢杆菌感染、炎症性肠病、顽固性便秘、代谢病、肠道免疫缺陷、肠道过敏等疾病的治疗［31］，希望通过本研究能够为严重烧伤患者粪菌移植治疗提供参考。当然文中只分析了小样本患者某个时间点的菌群结构变化，本课题组后续将继续进行相关研究，实现对烧伤发展的早期预测及干预，为严重烧伤患者的肠道微生态失衡的治疗提供理论依据。
所有作者均声明不存在利益冲突
