本指南成立了多学科指南制定工作组，主要涵盖器官移植学、病理学、病毒学、免疫学、检验学、影像学等多学科专家。证据的检索和评价由中山大学附属第一医院牵头完成。所有工作组成员均已填写利益声明表，不存在与本指南直接的利益冲突。

本指南适用于各级医疗机构对于肾脏移植受者BKPyV感染的临床诊疗工作。指南的使用者为各级医疗机构相关学科的医务工作者。指南推荐意见的应用目标人群为有意向且适宜接受诊疗的肾脏移植BKPyV感染受者。

通过系统检索肾脏移植BKPyV感染受者领域已发表的指南、共识、规范、系统评价和荟萃分析，随机对照实验（randomized controlled trial ，RCT ）、非RCT队列研究和病例对照研究等类型文献以及部分专家访谈，工作组初拟了涉及病毒生物学、流行病学特点、临床表现、诊断、预防、治疗、随访、预后等方面关键问题，涵盖具体临床问题21个。

指南制定工作组成立了证据检索与评价小组，针对最终纳入的关键问题，按照PICO原则[人群（Population ）、干预（Intervention）、对照（Comparison）、结局（Outcome ）]进行文献检索。检索数据库为MEDLINE (PubMed）、Web of Science、万方知识数据服务平台和中国知网数据库。中、英文检索词为肾脏移植（kidney transplantation）、BK多瘤病毒（BK polyomavirus/BKPyV ）、感染（infection）、肾病（nephropathy ）、危险因素（risk factors ）、实验室检测（laboratory testing）、病理（pathology ）、诊断（diagnosis ）、无创诊断（non-invasive diagnosis）、长期存活（long-term survival）等。工作组也对肾脏移植受者BKPyV感染相关综述、指南的参考文献进行滚雪球式检索。证据检索截止日期为2023年7月30日。

本指南采用《牛津循证医学中心分级2009版》（https ：//www. cebm. ox. ac. uk/resources/levels-of-evidence/oxford-centre-for-evidence-based-medicine-levels-of-evidence-march-2009， 表1 ）对证据质量及推荐意见强度进行分级。综合考虑证据、我国肾脏移植现状、实验室检测成本和利弊等因素后，指南工作组提出了符合我国肾脏移植受者BKPyV感染临床诊疗的推荐意见46条。工作组完成初稿撰写后，中华医学会器官移植学分会组织了全国器官移植与相关学科专家进行2轮会议集体讨论，工作组根据反馈意见对初稿进行修改并最终形成指南终稿。

临床问题1：BKPyV活动性感染有哪些临床表现？

推荐意见1：肾脏移植受者BKPyV活动性感染的临床表现不典型，建议在出现移植肾功能下降时进行排查（推荐强度C，证据等级4）。

推荐意见说明:

BKPyV活动性感染的临床表现不典型。在免疫功能正常人群中，可出现如上呼吸道症状、发热等"流感样"原发性感染表现。但10%~68%的肾脏移植受者在BKPyV早期活化、复制时，缺乏特征性的临床症状和体征 ^{[ 19 ]}。发生BKPyVN时，受者的症状主要与移植肾功能不全密切相关，早期血清肌酐可维持基线水平，进展期血清肌酐水平显著升高。活动性BKPyV感染有时可导致出血性膀胱炎、输尿管狭窄、尿路梗阻、淋巴管瘤、脑炎、肺炎、视网膜炎、结肠炎、毛细血管渗漏综合征、噬血细胞综合征以及尿路上皮癌等 ^{[ 20 , 21 ]}。

临床问题2：检测尿液和血浆中BKPyV DNA有何临床意义？

推荐意见2：推荐对所有肾脏移植受者定期监测BKPyV复制程度，以识别出需要治疗的高危受者（推荐强度A，证据等级1a）。

推荐意见3：推荐应用定量聚合酶链反应检测尿液和血浆中BKPyV DNA载量来评估BKPyV复制的程度（推荐强度A，证据等级1a）。

推荐意见说明:

应用聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）检测尿液和血浆中BKPyV DNA载量是临床早期监测感染状态的重要方法。需要注意的是，检测结果显示尿BKPyV DNA阳性时（即BKPyV DNA尿症），并不能明确移植肾内病毒复制水平的高低。事实上，即使在健康献血者中，也可能发现尿BKPyV DNA阳性 ^{[ 22 ]}。一项国际多中心研究结果显示，5%（19/378）术前存在低水平BKPyV DNA尿症（BKPyV DNA载量<10 ⁵ copies/ml）的肾脏移植受者在术后未出现高水平BKPyV尿症[尿BKPyV DNA载量≥10 ⁷ copies/ml、检查可见诱饵细胞（decoy细胞）和聚集型多瘤病毒颗粒（"haufen"小体）、高水平VP1 mRNA]或血浆BKPyV DNA阳性（即BKPyV DNA血症） ^{[ 23 ]}。相比血浆，尿液中的BKPyV DNA载量存在更高的变异性且可能超出PCR的检测范围，这可能与尿液成分的生理变化有关。同时有研究显示，尿BKPyV DNA载量与BKPyVN风险增加并无相关性 ^{[ 24 , 25 ]}。定量检测血浆BKPyV DNA载量对确诊BKPyVN的阳性预测值可达30%~50%，高于高水平尿BKPyV DNA载量及尿细胞学检查，并有2~6周窗口期 ^{[ 26 ]}。当存在高血浆BKPyV DNA载量、NCCR重排或肾功能障碍时，BKPyVN的阳性预测值可增至90%以上 ^{[ 27 ]}。研究显示，BKPyVN的发生风险与血浆BKPyV DNA载量呈正相关 ^{[ 24 , 28 ]}。在缺乏临床疾病证据的情况下，如果BKPyV DNA载量>10 ⁴ copies/ml，进展为BKPyVN的阳性预测值升高 ^{[ 24 , 28 ]}。在免疫抑制强度降低后，血浆BKPyV DNA载量处于10 ³~10 ⁴ copies/ml的肾脏移植受者的血浆病毒DNA比载量持续>10 ⁴ copies/ml或活检证实为BKPyVN受者，更易被清除 ^{[ 29 , 30 , 31 , 32 ]}。由于移植肾内BKPyV感染分布具有局灶性，且存在移植肾穿刺病理活检取材受限等问题，临床治疗的目标不仅应包括SV40 LTag免疫组织化学染色转阴，还应包括血BKPyV DNA的持久阴性。综上所述，优先使用定量PCR法监测肾脏移植受者血浆BKPyV DNA载量更具筛查和评价预后的临床意义。

临床问题3：肾脏移植受者应在何时进行尿液BKPyV DNA载量筛查？

推荐意见4：可以考虑对难以接受常规血浆BKPyV DNA载量监测的肾脏移植受者进行尿液BKPyV DNA载量监测（与血浆监测时间点相同，见下文）。如果BKPyV DNA尿症阳性，则进一步检测血浆病毒载量（推荐强度D，证据等级5）。

推荐意见5：建议BKPyV DNA尿症阴性时，排除BKPyVN诊断（推荐强度B，证据等级2a）。

推荐意见6：在大规模筛查时，建议检测尿液BKPyV DNA载量（推荐强度B，证据等级2b）。

推荐意见说明:

由于尿液取样作为一种无创操作，安全、便捷；高水平BKPyV DNA尿症的发生通常较BKPyV DNA血症提前4~12周 ^{[ 33 ]}；且BKPyV DNA尿症对于BKPyVN的阴性预测值接近100% ^{[ 24 ]}，因此可以帮助临床医生及时有效地排除BKPyVN。但尿液BKPyV DNA载量检测仍有以下不足：（1) BKPyVN的阳性预测值低；（2）尿液BKPyV DNA载量有一定生理波动，连续2次检测的BKPyV DNA载量相差100倍才有诊断意义；（3）相对血浆，减少免疫抑制剂用量后，尿液BKPyV DNA载量的下降有延迟性（甚至不能被清除），这可能导致免疫抑制剂用量过度减少而排斥反应发生风险上升；（4）高水平BKPyV DNA尿症持续大于2个月时，其预测BKPyVN的阳性预测值会上升，但同样会增加延迟诊断及进展为BKPyVN的风险；（5）目前尚缺乏仅根据BKPyV DNA尿症而非血症来指导受者免疫抑制剂用量的风险和益处相关的独立研究。

虽然上述这些局限性限制了尿液BKPyV DNA载量监测在指导临床治疗干预中的应用。但研究显示，有约5%~30%经活检证实的BKPyVN受者，在整个病程中仅表现为单纯BKPyV DNA尿症，血浆BKPyV DNA阴性 ^{[ 34 , 35 ]}。因此，综合国内各中心经验以及检测尿液中BKPyV DNA载量的优势，尿液检测在指导临床决策方面仍有一定意义，尤其是对于血浆BKPyV DNA阴性的持续性高水平BKPyV DNA尿症受者。若仅监测尿液，频次应与血浆相似，一旦出现阳性结果应立即转为血浆监测。但对于单纯BKPyV DNA尿症受者，具体达到何阈值及持续多长时间后进行移植肾穿刺病理活检及治疗干预，仍需进行大量的前瞻性试验来验证。

临床问题4：肾脏移植受者应在何时进行血浆BKPyV DNA载量检测？

推荐意见7：推荐对所有可以接受定期血浆BKPyV DNA载量检测的肾脏移植受者进行监测，以识别需要治疗的疑似/拟诊/活检证实的BKPyVN受者（推荐强度A，证据等级1a）。

推荐意见8：建议对尿液BKPyV DNA阳性、急性排斥反应治疗后或不明原因血清肌酐水平升高以及接受移植肾穿刺病理活检的受者进行血浆BKPyV DNA载量检测（推荐强度B，证据等级2b）。

推荐意见说明:

肾脏移植后BKPyV再激活经历病毒尿症、病毒血症最后发展到BKPyVN，是一个递进式的发展过程，适时通过降低免疫抑制强度阻断这一进程可以预防BKPyVN的发生和进展。血浆BKPyV DNA是预测BKPyVN较好的生物学标志物，定量PCR检测血浆BKPyV DNA载量对确诊BKPyVN的阳性预测值高达90 % ^{[ 27 ]}。首次检测到BKPyV DNA血症后，应在1~3周内重复检测，以确认BKPyV DNA血症是否自发清除、持续存在或已达到需要干预的阈值。有些中心会用BKPyV DNA尿症作为筛查工具，但尿液BKPyV DNA载量与BKPyVN风险增加并无相关性 ^{[ 24 ]}。所以当出现病毒尿症时，应进行血浆BKPyV DNA载量检测，以识别需要治疗的疑似/拟诊/活检证实的BKPyVN受者。BKPyVN也可能发生在抗排斥治疗后，其风险取决于抗排斥治疗的强度和药物类型，加强对此类受者血浆BKPyV DNA载量的监测有助于早期发现BKPyVN。此外，由于移植肾穿刺病理活检仍有一些局限性，进行血浆BKPyV DNA载量的检测有助于临床医生进行诊断与治疗。

临床问题5：肾脏移植受者应多长时间筛查1次血浆BKPyV DNA载量？

推荐意见9：建议所有肾脏移植受者在术后9个月内每月检测1次血浆BKPyV DNA载量；术后9个月~2年内，每隔3个月检测1次（推荐强度B，证据等级2b）；术后2~5年内，至少每年检测1次（推荐强度D，证据等级5）。

推荐意见10：对于首次血浆BKPyV DNA阳性受者，建议在1~3周内再次检测，以区分持续性和一过性BKPyV DNA血症，获得病毒复制动态信息并指导临床干预（推荐强度B，证据等级2b）。

推荐意见说明:

BKPyV DNA血症多发生在肾脏移植后6个月内。另有约20%~30%的BKPyV DNA血症发生在移植6个月后，但这部分受者大多可以通过将每个月的筛查延长至第9个月来避免延误诊治 ^{[ 32 , 36 , 37 ]}。研究显示，持续到移植后1年以上的筛查，可以发现18%的迟发BKPyVN ^{[ 38 ]}。随着筛查时间延长，筛查频率可逐渐降低。因此，移植2年后筛查频率可以减少到每年至少1次，直到术后5年。上述筛查频率可以根据各中心的免疫抑制剂诱导方案、维持方案和BKPyV复制发生率等做个性化调整。

临床问题6：如何进行标准化的BKPyV DNA定量检测？

推荐意见11：推荐针对BKPyV基因组高度保守区域设计扩增序列并且长度小于150 bp（推荐强度A，证据等级1b）。

推荐意见12：推荐检测体系溯源到WHO的国际标准品（推荐强度A，证据等级1b）。

推荐意见13：建议使用自动化流程或者方法，以减少手工操作的影响（推荐强度D，证据等级5）。

推荐意见说明:

PCR定量不准或出现假阴性的原因包括病毒靶序列变异导致与引物或探针错配；出现假阳性的原因主要是交叉检测到其他多瘤病毒[如JC多瘤病毒（JC polyomavirus，JCPyV）]基因组中的保守序列。建议在设计扩增序列时，针对编码sTag或LTag以及VP1、VP2或VP3基因区中的高度保守性序列进行选择 ^{[ 39 , 40 ]}。扩增片段的长度应小于150 bp，以确保血浆中的BKPyV DNA载量可以被准确定量 ^{[ 40 ]}。此外，过长时间的运输、储存、冷冻和解冻也会显著降低BKPyV DNA载量的测定结果。使用国际认可的校准品有望提高BKPyV DNA载量结果的可比性。使用自动化的流程，可以减少手工操作对检测结果的影响。

临床问题7：尿细胞学检查对诊断多瘤病毒感染有何意义？

推荐意见14: decoy细胞检查可用于筛查多瘤病毒感染，但不建议根据结果进行干预治疗（推荐强度B，证据等级2a）。

推荐意见说明:

尿沉渣巴氏染色或直接涂片相差显微镜下所观察到的、因感染了多瘤病毒而在细胞内出现嗜碱性核内包涵体的、脱落的尿路上皮和肾小管上皮细胞，被称为"诱饵细胞"（decoy细胞） ^{[ 41 ]}。检出decoy细胞可以作为筛查多瘤病毒感染或治疗转归的一种方法，但需要有经验的专科医生对尿液进行正确处理和观察。如果decoy细胞检查结果为阳性，通常意味着存在中、高水平的多瘤病毒DNA尿症；但对于多瘤病毒肾病患者，其阳性预测值仅为25%~ 30 % ^{[ 24 , 28 ]}。因此，不应仅基于尿细胞学检查结果来治疗。此外，由于尿液容易受外界因素及治疗方案影响，对于怀疑多瘤病毒感染者，应行多次检测以免漏诊。需要注意的是，仅凭decoy细胞的形态无法区分是BKPyV还是JCPyV感染。

临床问题8: BKPyV感染受者进行移植肾穿刺病理活检的指征是什么？

推荐意见15：推荐对肾功能受损（如血清肌酐较基线升高>15%、有蛋白尿、血尿等）的BKPyV DNA血症受者进行移植肾穿刺病理活检（推荐强度A，证据等级1a）。

推荐意见16：可考虑对肾功能稳定但免疫高风险的BKPyV DNA血症受者行移植肾病理活检（推荐强度C，证据等级4）。

推荐意见17：无BKPyV DNA血症而肾功能受损的高水平BKPyV DNA尿症受者可考虑行移植肾穿刺病理活检（推荐强度D，证据等级5）。

推荐意见说明:

具有以下情况的BKPyV DNA血症或高水平BKPyV DNA尿症受者需考虑行移植肾穿刺病理活检，包括：血清肌酐较基线升高超过15%，合并蛋白尿、血尿，群体反应性抗体升高、供者特异性抗体阳性、血型不相容肾脏移植、多次移植或既往出现急性排斥反应等 ^{[ 2 ]}。

临床问题9: BKPyVN有何病理学特征及需要与哪些疾病相鉴别？

推荐意见18：BKPyVN的病理特征主要表现为光镜下典型的病毒包涵体及对应SV40 LTag免疫组织化学染色阳性；电镜下可见直径40~50 nm的病毒颗粒（推荐强度B，证据等级3a）。建议对BKPyVN与排斥反应（推荐强度B，证据等级2b）及其他病原体感染（推荐强度B，证据等级3a）进行鉴别。

推荐意见说明:

BKPyVN的特征性病理表现为，被感染的肾小管上皮细胞的细胞核显著增大、深染，核内出现无定形、嗜碱性、毛玻璃样病毒包涵体，免疫组织化学染色可进一步明确诊断。BKPyV感染由髓质区肾小管向皮质区发展并逐渐扩大，晚期可进展至肾小球壁层上皮细胞甚至足细胞 ^{[ 42 , 43 ]}。病变程度通常从轻微、局部的病毒复制迹象，逐渐进展至严重的肾小管损伤、间质炎和小管炎，甚至明显的小管萎缩及间质纤维化。电镜下可见肾小管上皮细胞的细胞核或胞质中密集呈晶格状排列整齐的或分散存在的直径40~50 nm的均一病毒颗粒。此外，BKPyVN需要与急性排斥反应、包括JCPyV、巨细胞病毒、腺病毒在内的其他病毒相关肾病和移植肾细菌感染进行鉴别 ^{[ 2 , 3 , 44 , 45 , 46 ]}。相关的鉴别方法请详见《中国肾脏移植病理学临床诊疗指南（2023版）》相关内容。

临床问题10：BKPyVN应该如何进行分期？

推荐意见19：AST-传染病实践协会组织学分期建议根据炎症浸润和间质纤维化/肾小管萎缩程度不同，将BKPyVN分为A、B1、B2、B3和C五期（推荐强度B，证据等级3a）。

推荐意见20：Banff组织学分期建议根据组织内多瘤病毒载量水平（pvl）和间质纤维化（ci）程度，将BKPyVN分为1、2、3期（推荐强度B，证据等级2b）。

推荐意见说明:

目前主要采用AST-传染病实践协会组织学分期 ^{[ 47 ]}和Banff组织学分期 ^{[ 48 ]}对BKPyVN进行病理学分期。其中，AST分期基于对小管炎、间质炎和小管萎缩及间质纤维化（interstitial fibrosis，ci）程度的半定量评估，将BKPyVN分为A、B1、B2、B3和C五期（ 表3 ） ^{[ 47 ]}。Banff组织学分期则是基于对移植肾组织内多瘤病毒载量水平（polyomavirus load level，pvl）和ci程度的半定量评分进行分期（ 表4 ） ^{[ 48 ]}。其中，pvl评分指整个活检组织（皮质和髓质）中阳性小管（光镜下至少有一个上皮细胞含有病毒包涵体或SV40 LTag免疫组织化学阳性的肾小管）所占比例，无阳性小管为0分，阳性小管占比≤1%为1分（轻度），阳性小管占比>1%但≤10%为2分（中度），阳性小管占比>10%为3分（重度）。ci评分指皮质区间质纤维化程度，有轻微纤维化，占比≤5 %为0分；有轻微纤维化，占比>5%但≤25%为1分；有中度纤维化，占比>25%但≤50%为2分；有重度纤维化，占比>50%为3分。这2种分期方法都与移植肾丢失风险相关，而ci是一个共同的重要预后因素。通常建议将2种分期方法结合起来，以获得更全面的预后信息进而指导临床决策，并且可以实现不同医疗中心间的比较。

临床问题11：通过移植肾穿刺病理活检诊断BKPyVN有哪些注意事项？

推荐意见21：在对临床怀疑为早期BKPyVN受者进行活检取材时，建议至少取2条组织标本，其中1条应深达髓质（推荐强度B，证据等级3b）。

推荐意见22：推荐使用免疫组织化学（针对SV40 LTag的抗体，PAb 416）染色来确诊病理活检证实的PyVN（推荐强度A，证据等级1a）。病毒学特异性检测确定为BKPyV感染而非JCPyV，或针对BKPyV的基因组原位杂交检测为阳性，方可诊断为BKPyVN（推荐强度B，证据等级3a）。

推荐意见说明:

一项研究对血浆BKPyV DNA阳性受者同时穿刺的多条肾组织进行SV40 LTag免疫组织化学染色，结果有约30%受者的组织标本出现了染色结果不一致，即同时具有阳性和阴性 ^{[ 49 ]}。另有多项研究报道，约10%~30%的BKPyV DNA血症受者可出现肾活检假阴性 ^{[ 2 , 49 , 50 , 51 ]}。可能的原因包括：BKPyV在肾脏中呈局灶性分布和未获取到早期病变的肾髓质甚至深部髓质，必要时可考虑重复活检。

进行针对SV40 LTag的免疫组织化学染色对于证实多瘤病毒肾病十分重要。病理表现为小管间质炎时，解读免疫组织化学阳性结果时应注意（ 表5 ）：（1）不同实验室的免疫组织化学结果可能差异很大，但对于定性诊断并无影响 ^{[ 52 ]}。（2）早期感染未形成病毒包涵体、组织病理学改变不明显或经治疗后缓解的病例，也可出现阳性结果。（3）临近间质炎症浸润区域的肾小管不一定存在病毒感染 ^{[ 53 , 54 , 55 , 56 ]}。（4）当小管炎与小管周围的炎症细胞同时存在时，小管炎严重程度可能与周围炎症浸润程度不匹配。

免疫组织化学结果阴性时，小管间质炎需结合临床相关检查结果合理解读（ 表5 ）：（1）对于持续血浆BKPyV DNA阳性受者，无论血清肌酐是否升高，活检的特征可表现为间质炎和小管炎 ^{[ 50 , 57 , 58 ]}；且在血BKPyV DNA转阴后，间质炎和小管炎的持续时间可以延长。（2) BKPyV DNA血症阴性但有高水平BKPyV尿症的肾脏移植受者活检组织也可能出现炎症细胞的浸润。此时活检结果不能简单的用单纯的临界排斥反应及Ia或Ib级T细胞介导的排斥反应（T cell-mediated rejection, TCMR）来解释，建议回顾既往活检结果并进行详细描述，临床医生需要结合临床、实验室数据及活检结果来进行综合判断，必要时可考虑经验性治疗后重复活检。

肾脏移植受者基于实验室检测及移植肾穿刺活检的组织病理学BKPyV感染、复制和疾病定义如下：（1）BKPyV感染：可以检测到BKPyV的特定抗原/核酸或者机体的特异性免疫反应（病毒特异性抗体/T细胞），但潜伏感染或低水平复制时可能难以通过上述检测确认。（2）BKPyV复制：连续检测到BKPyV抗原或分离培养时病毒载量增加。（3）可能BKPyVN （possible BKPyVN）：仅有高水平BKPyV尿症，病毒DNA血症及移植肾组织活检病理学为阴性。（4）疑似BKPyVN （probable BKPyVN）：有高水平BKPyV尿症和病毒载量在10 ³~10 ⁴ copies/ml超过2周的持续性BKPyV DNA血症，移植肾组织活检病理学为阴性。（5）拟诊BKPyVN （presumptive BKPyVN）：有高水平BKPyV尿症和单次病毒载量大于10 ⁴ copies/ml的持续性BKPyV DNA血症，移植肾组织活检病理学为阴性。（6）病理检查证实的BKPyVN (biopsy-proven BKPyVN）：具有特征性病理表现及SV40 LTag免疫组织化学染色阳性，病毒学特异性检测确定为BKPyV感染，或针对BKPyV的基因组原位杂交检测为阳性。

临床问题12：免疫学监测对BKPyV感染程度的判断有何意义？

推荐意见23：暂不建议对肾脏移植受者常规检测BKPyV特异性抗体或细胞免疫状态（推荐强度C，证据等级4）。

推荐意见说明:

研究显示，供者中检测到的BKPyV特异性抗体与肾脏移植受者BKPyV DNA血症和活检证实的BKPyVN风险上升有关，尤其是在供者BKPyV IgG水平较高或受者BKPyV IgG水平较低或检测不到的情况下 ^{[ 59 , 60 , 61 ]}。但肾脏移植受者术前BKPyV抗体阳性并不能预防高水平BKPyV尿症或BKPyV DNA血症 ^{[ 33 , 62 ]}。大多数肾脏移植受者即使术前BKPyV抗体阳性，术后仍可能发展为高水平BKPyV尿症、BKPyV DNA血症和BKPyVN ^{[ 63 ]}。

目前可用的BKPyV特异性抗体测定是在血浆或血清中使用基于衣壳蛋白VP1的ELISA方法，根据酶标二抗可以区分IgG、IgM或IgA，但无法区分结合抗体的功能活性，如调理和/或中和活性。利用特定病毒抗原表位刺激后，使用酶联免疫斑点分析、细胞内细胞因子染色和流式细胞术等功能分析技术可以量化产生细胞因子的T细胞，即BKPyV特异性T细胞。研究表明，外周血中的病毒特异性T细胞与限制病毒复制和疾病进展有关 ^{[ 64 , 65 ]}。但其数量有限且阴性预测值较低，限制了其临床大规模应用。因此，在使用BKPyV体液免疫或细胞免疫检测进行供受者感染风险分层、器官分配、筛查或指导治疗前，仍需完善相关检测技术并进行前瞻性随机对照研究进行验证。

临床问题13：确诊BKPyV感染还有哪些辅助检测手段？

推荐意见24：目前不建议用BKPyV基因分型、NCCR重排或其他生物标志物作为诊断或监测手段来指导临床诊治（推荐强度C，证据等级4）。

推荐意见说明:

确诊BKPyV感染除使用定量PCR检测血浆和尿液样本中的BKPyV DNA载量外，近年来还出现了许多新的检测方法。具体包括：利用逆转录技术检测VP1 mRNA或microRNA；用电子显微镜检测尿液中的PyV病毒颗粒和病毒粒子聚集体；用下一代测序技术评估供、受者中病毒的血清型和基因型，捕获NCCR重排；尿沉渣细胞学检查 ^{[ 66 ]}等。此外，有多种生物标记物可用于预测BKPyV血症，包括：淋巴细胞计数 ^{[ 65 ]}、非特异性IgG水平、供者来源细胞游离DNA ^{[ 67 ]}、细胞因子、趋化因子及其配体 ^{[ 68 , 69 ]}、血浆细环病毒载量以及人类白细胞抗原（human leucocyte antigen，HLA）或杀伤细胞免疫球蛋白受体多态性 ^{[ 70 , 71 ]}等。同时有研究表明，高频超声检查对诊断BKPyVN和区分排斥反应也具有重要价值 ^{[ 72 ]}。需要注意的是，尽管这些方法具有无创的优势，但现有的研究数据还不足以支持其指导临床应用，在进一步开发和验证前建议仅作辅助参考。

临床问题14：如何进行肾脏移植受者BKPyV相关性肿瘤的筛查？

推荐意见25：建议将血浆BKPyV DNA载量检测联合泌尿系统彩色多普勒超声检查用于筛查肾脏移植受者BKPyV相关尿路上皮癌（推荐强度C，证据等级4）。

推荐意见说明:

长期高水平BKPyV复制不仅与NCCR的重排有关，还会增加BKPyV基因组和尿路上皮癌整合的风险 ^{[ 27 , 73 , 74 , 75 , 76 , 77 ]}。有研究发现，在持续性BKPyV DNA血症和确诊BKPyVN后，肾脏移植受者的尿路上皮癌发病率出现上升[基于性别、年龄、移植时间和基线诱导免疫抑制方案调整的发病率比（incidence rate ratio，IRR）= 2.2 ，95 % CI：0.9~5.4]，表明BKPyV与尿路上皮癌变间可能存在关联 ^{[ 74 ]}。尿路上皮癌的诊断需通过膀胱镜检查或手术切除获得病理组织，尚无BKPyV相关性尿路上皮癌的特异性筛查方法，临床中可在常规泌尿系统彩色多普勒超声筛查的基础上联合检测血浆BKPyV DNA载量。